体外研究贺斯、佳乐施、万汶对成人静脉血辅助性T淋巴细胞分化的影响

摘要

研究背景 机体免疫系统的变化越来越引起人们的关注，其对疾病的预后和转归有重要的影响。组织损伤，严重的应激反应，输血均可抑制机体的免疫系统，延缓患者康复，导致围术期感染、肿瘤复发和转移.有研究表明，输血引起的免疫抑制在其中的作用最为重要。为预防交叉感染，缓解输血引起的免疫抑制，因此血浆代用品成为容量治疗的重要手段。它可以补充血浆容量，维持血流动力学稳定；改善微循环和组织灌注，增加组织氧供；减少并避免血液制品输入并发症.虽然血浆代用品对机体扩容，肝肾功能，凝血方面的作用已有许多研究报告，但其对免疫系统的影响有待进一步研究。贺斯、佳乐施、万汶是常用的胶体液，贺斯和万汶为羟乙基淀粉制剂，佳乐施为明胶制剂。 目的： 观察比较贺斯、佳乐施、万汶对成人静脉血辅助性T淋巴细胞(Th细胞)分化的影响。 方法： 采集18例健康志愿者外周静脉血20ml，采用随机区组设计，每份血样均参与下列各组研究。根据临床常用剂量设置20％，40％(体积比)两个血液稀释浓度，分为空白对照组(C组)、不同剂量贺斯组[20％(H1组)、40％(H2组)]、不同剂量佳乐施组[20％(G1组)、40％(G2组)]、不同剂量万汶组[20％(V1组)、40％(V2组)]。用两种不同方法评估Th细胞的功能分化情况：(1)胞内细胞因子检测：将全血在体外用相应剂量的药物预先培养24h，然后加入刺激剂(氟波醇乙酯、离子霉素及蛋白质转运抑制剂)，刺激4h，采用流式细胞技术测定每份样本中Th1及Th2细胞亚群比例，并计算Th1细胞与Th2细胞的比值(Th1/Th2)。(2)分离外周血单个核细胞(PBMCs)，经药物预处理24小时后，加入刺激剂植物血球凝集素继续培养48小时，采用流式蛋白检测技术(CBA)检测培养上清中Th1(IFN-γ、TNF-α、IL-2)及Th2(IL-4、IL-6、IL-10)型细胞因子的浓度。统计分析采用SPSS11.5软件，组间比较采用随机区组设计方差分析，P<0.05为差异有统计学意义. 结论： 在20％浓度时，贺斯、万汶可促使Th细胞向Th1细胞分化，佳乐施作用不明显；在40％浓度时，贺斯、万汶抑制Th2细胞的分化，佳乐施对Th1扣Th2细胞的分化均呈抑制作用。万汶在两种浓度下均可促使Th1/Th2比值升高。

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致谢

综述 流式细胞术检测胞内细胞因子的表达及意义