SOCS3在子痫前期胎盘组织中的表达及其对滋养细胞增殖和迁移能力的影响

摘要

目的: 探究细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling3，SOCS3)基因在人子痫前期胎盘组织中的表达情况及其对HTR-8/SVneo细胞增殖与迁移能力的影响。 方法: 1.选取2011年10月至2012年10月在南京医科大学第一附属医院住院分娩的15例重度子痫前期孕妇为子痫前期组，15例正常孕妇作为正常妊娠组。 2.采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应和Western印迹技术检测两组孕妇胎盘组织中SOCS3 mRNA和蛋白表达水平。 3.体外培养的HTR-8/SVneo细胞分别转染SOCS3小分子干扰RNA(实验组)和无意义的阴性对照小分子干扰RNA（阴性对照组）。 4.采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应和Western印迹技术检测体外培养的HTR-8/SVneo细胞中SOCS3 mRNA和蛋白表达水平。 5.采用克隆形成实验和3-(4，5)-二甲基噻唑-(2，5)-二苯基溴化四氮唑蓝法(MTT)检测转染后两个实验组中细胞的增殖能力。 6.应用流式细胞仪对转染后两个实验组中细胞进行细胞周期分析。 7.采用transwell小室实验检测转染后两个实验组中细胞迁移能力。 结果: 1.子痫前期组的胎盘组织中SOCS3 mRNA和SOCS3蛋白水平显著低于正常组胎盘组织，分别为0.25±0.03和0.21±0.05，均低于正常妊娠组0.71±0.08和0.75±0.12。差异均有统计学意义(p＜0.05)。 2.小分子干扰RNA转染24 h后，实验组SOCS3 mRNA水平低于阴性对照组0.39±0.02与1.00±0.04，蛋白水平也较低(0.0037±0.0014与1.5149±0.0357)。实验组中SOCS3 mRNA和SOCS3蛋白水平表达均降低，差异均有统计学意义(P＜0.05)，证明干扰SOCS3表达成功。 3.MTT法检测证实实验组细胞增殖能力降低，转染后48、72和96 h实验组增殖能力分别为0.23±0.01，0.32±0.02和0.37±0.02，均低于阴性对照组（分别为0.39±0.02，0.55±0.04和0.86±0.04），差异有统计学意义(P＜0.05)。 4.克隆形成实验证实转染10 d时实验组克隆形成细胞个数显著低于阴性对照组，实验组细胞数为116±15，低于阴性对照组312±24，差异有统计学意义(P＜0.05)。 5.应用流式细胞仪分析细胞周期发现转染48 h后，实验组G1/G0期细胞比例为（55.75±2.21）％，高于阴性对照组[（47.88±1.87）％](t=45.43， P＜0.05);S期细胞比例为（31.59±0.83）％，低于阴性对照组[（37.38±1.34）％](t=20.06，P＜0.05)。两组分别比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。 6.transwell小室实验证实转染48 h后，实验组穿膜细胞数为（93±11）个，低于阴性对照组（167±17）个，两组相比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 1.子痫前期患者胎盘组织中SOCS3水平与正常妊娠孕妇相比较表达下降，推测SOCS3可能参与了子痫前期的发生发展过程。 2.SOCS3可能通过降低表达水平来抑制滋养细胞的增殖和迁移能力，从而在子痫前期的发病过程中起作用。

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摘要

英文缩略词表

前言

实验一 SOCS3基因在子痫前期胎盘组织的表达

1．材料

2．研究方法

3．结果

4．讨论

实验二 SOCS3基因对人滋养细胞HTR-8／SVneo增殖和迁移能力的影响

1．材料

2．方法

3．结果

4．讨论

结论

参考文献

发表的文章

综述 细胞因子信号转导抑制因子3与妊娠相关疾病的研究进展

致谢