重组腺病毒H101联合索拉非尼对肝癌细胞杀伤作用及相关机制的体外研究

摘要

目的:
　　研究重组腺病毒H101和索拉非尼(sorafenib)单药或两药联合对人肝细胞癌细胞株HepG2和Hep3B增殖及凋亡的影响，并初步探讨其相关作用机制。
　　方法:
　　将重组腺病毒H101和索拉非尼以单药及联合的方式分别作用于人肝癌细胞株HepG2和Hep3B，另设不加药对照组，CCK-8法检测细胞存活率，AnnexinⅤ-PI流式细胞术及DAPI染色检测细胞凋亡。流式细胞术检测索拉非尼处理后人肝癌细胞株HepG2和Hep3B对携带绿色荧光蛋白的非复制型腺病毒(Ad-GFP)敏感性变化。蛋白印迹法(Western blot)检测索拉非尼处理后人肝癌细胞株HepG2和Hep3B的柯萨奇-腺病毒受体(CAR)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(pERK)蛋白表达水平变化。
　　结果:
　　1、重组腺病毒H101和索拉非尼单药均可显著抑制人肝癌细胞株HepG2和Hep3B增殖(P＜0.05)并诱导细胞凋亡;且与H101、索拉非尼单药相比，两药联合作用更为显著(P＜0.05)。
　　2、低浓度索拉非尼在抑制Raf/MEK/ERK信号传导途径活性的同时，可上调人肝癌细胞株HepG2和Hep3B表面CAR的表达，增加肿瘤细胞对腺病毒敏感性。
　　结论:
　　重组腺病毒H101、索拉非尼单药及两药联合均能抑制HepG2和Hep3B细胞增殖并诱导其凋亡，且在特定浓度范围内两药联合对细胞增殖存在协同抑制作用。其作用机制可能与索拉非尼通过抑制Raf/MEK/ERK信号传导途径上调HepG2和Hep3B细胞表面CAR的表达并增加细胞对腺病毒的敏感性，进而增强溶瘤腺病毒的抗肿瘤作用相关。

目录

声明

摘要

主要缩略词表

前言

第一章 实验材料和细胞培养

第二章 重组腺病毒H101及索拉非尼单药对肝癌细胞株HepG2和Hep3B的体外增殖抑制作用

1、实验方法

2、结果

第三章 重组腺病毒H101联合索拉非尼对肝癌细胞株HepG2和Hep3B的体外杀伤作用

1、实验方法

2、结果

第四章 索拉非尼通过抑制Raf／MEK／ERK途径上调肝癌细胞表面CAR的表达

1、实验方法

2、实验结果

第五章 讨论

第六章 结论

第七章 综述 溶瘤腺病毒治疗肝癌的研究进展

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表论文

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