Tenascin-C在小鼠动脉粥样硬化斑块中的表达及靶向MR体内成像的实验研究

摘要

目的
　　1.检测Tenascin-C在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中，不同时期(4、8、16、24、32w)表达的动态变化，探讨其表达特性。
　　2.探讨MR靶向探针anti-Tenascin-C-USPIO在动脉粥样硬化斑块中的特异性成像，为临床动脉粥样硬化分子成像的应用提供实验依据。
　　材料和方法
　　1.取ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠50只，高脂饲料喂养，建立小鼠动脉粥样硬化(AS)模型，C57BL/6小鼠50只为同源对照组，普通饮食喂养。分别于喂养第4、8、16、24、32周(w)时处死小鼠，检测血脂，显微镜观察斑块病理改变并进行定量分析，免疫组织化学方法检测动脉粥样硬化斑块内Tenascin-C的表达。
　　2.20只ApoE-/-小鼠予高脂饮食喂养建立动脉粥样硬化模型，将其分为靶向探针组10只，对照组10只，分别喂养至16、24w，探针组注射anti-Tenascin-C-USPIO，对照组注射单纯USPIO(n=5/组/周)，于注射24h后进行7.0T MR成像，检测斑块信号改变。成像后立刻取主动脉标本进行Tenascin-C免疫组化染色，并行普鲁士蓝染色，观察斑块内铁沉积。
　　结果
　　1.模型组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平均高于对照组(P均＜0.05)。随着造模时间的进展，模型组斑块面积及斑块面积/管腔面积比值不断增加，各时期比较均有统计学意义(P＜0.05)。模型组斑块内Tenascin-C表达量随着AS进展而升高，AS32w小鼠斑块内部Tenascin-C表达升高最显著，高于8、16、24w小鼠(0.49±0.07 vs0.04±0.02，0.12±0.03，0.21±0.04，P＜0.05)。
　　2.靶向探针组的斑块信号改变率较对照组明显降低(16w:-15.65±0.78％ vs.-3.43±2.57％;24w:-26.38±1.54％ vs.-11.12±1.60％，P＜0.05)。并且在靶向探针组中，24w时斑块的信号改变率较16w亦明显降低(P＜0.05)。免疫组化染色显示探针组Tenascin-C随着斑块进展表达升高，与MR图像斑块信号改变程度相一致。普鲁士蓝染色显示探针组斑块内较多蓝染颗粒，而对照组则极少。
　　结论
　　1.Tenascin-C的表达量随着斑块进展不断增加，主要表达于脂核周围及破裂的纤维帽中，Tenascin-C的表达水平变化可能与动脉粥样硬化进展及斑块不稳定性有关。
　　2.7.0T MR可以对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块模型进行活体评估。antiTenascin-C-USPIO探针可实现小鼠动脉粥样硬化斑块的靶向MR体内成像，用于监测斑块的进展，为动脉粥样硬化分子成像的进一步开展奠定了基础。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 Tenascin-C在Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块不同时期表达变化的研究

1．资料与方法

2．结果

3．讨论

第二部分 Tenascin-C在动脉粥样硬化斑块不同时期靶向MR体内成像的实验研究

1．资料与方法

2．结果

3．0 讨论

参考文献

第三部分 全文总结

文献综述 Tenascin-C在动脉粥样硬化中的作用及其分子成像的进展

附录

攻读硕士学位期间发表文章情况

致谢