富血小板纤维蛋白膜对大鼠再植牙牙周愈合影响的实验研究

摘要

研究目的:
　　外伤牙齿全脱位在前牙外伤中发病率高，治疗难度大，预后不稳定。如何改善再植牙牙周微环境，控制再植牙牙根吸收，促进再植牙牙周膜愈合一直是牙外伤领域亟待解决的课题之一。
　　富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin，PRF)是从血液中提取的第二代富含血小板、白细胞的生物材料，具有良好的生物学性能。研究表明PRF能够促进包括牙周组织在内的多种软、硬组织损伤的再生及修复。但由于全脱位牙再植的修复过程易受多种因素影响，且将PRF用于牙再植术的实验研究较少，牙再植术应用PRF后，牙周组织的反应情况及相关作用机制也尚不清楚。
　　本实验以大鼠上颌第一磨牙原位再植作为实验模型，自体心脏采血体外制备PRF膜，脱位牙复合PRF膜原位再植，观察局部应用PRF膜后，再植牙愈合过程，组织修复反应以及破骨细胞(osteoclast，OC)表达情况，探讨PRF对全脱位牙再植后牙周愈合的影响，为进一步实验研究及临床应用奠定理论基础。
　　方法:
　　(1) PRF膜制备及组织学观察:采用自体心脏采血法，提取PRF，压制成膜状;制作石蜡标本，进行苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin，HE)染色，光学显微镜下观察其组织学形态结构。
　　(2)全脱位牙再植实验动物模型建立及组织学观察:75只6w龄Wistar大鼠，随机分为即刻组、30min干燥保存组、60min干燥保存组，每组25只大鼠。拔除双侧上颌第一磨牙，每组随机选取一侧脱位牙复合PRF膜进行原位再植作为PRF膜实验组，对侧脱位牙直接原位再植作为对照组。分别于术后1d、3d、7d、14d、28d采用心内灌流固定法处死3组各5只大鼠。取上颌骨，制备标本，切片，HE染色，光学显微镜下观察牙再植术后牙周情况。
　　(3) OC表达检测:大鼠上颌骨标本切片，采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法(tartrate resistant acid phosphatase，TRAP)染色，观察PRF膜对牙再植术后牙周OC表达的影响。
　　结果:
　　(1) PRF膜组织学观察:采用的心脏采血法可以成功提取PRF，PRF呈凝胶状，表面光滑，质韧有弹性，可体外塑形成膜状。组织学观察证实PRF膜主体为HE红染的胶原，其周缘可见富集的蓝染白细胞，白细胞周缘可见薄层血小板、红细胞富集，胶原表面可见压制附着的白细胞及血小板。
　　(2)再植牙牙周组织学观察:所有再植牙无脱落。牙再植术后早期牙周组织炎症细胞浸润，后期牙周重建性修复反应与破坏性修复反应并存。即刻再植PRF膜组中，再植早期炎症细胞趋化延缓，炎性浸润持续时间延长，不利于远期牙周组织修复愈合;30min干燥再植组，添加PRF膜，促进再植早期炎症细胞趋化，有助于抑制炎症性根吸收发生、发展;60min干燥保存组，添加PRF膜，有助于抑制替代性吸收的发生。
　　(3)再植牙牙周OC表达:再植术后1天即可在牙槽骨骨髓腔及血管腔处检测到TRAP染色阳性的OC，随术后时间延长逐渐向牙根面迁移。即刻组，对照组根面OC表达量7d达峰值，PRF膜组14d达峰值，添加PRF膜能够延缓OC迁移、表达。30min干燥保存组中，PRF膜组及对照组OC表达趋势与即刻组PRF膜组、对照组相似，对照组OC表达在7d达峰值，PRF膜组14d达峰值。60min组，PRF膜组与对照组OC表达量均在14d达峰值。
　　结论:
　　添加PRF膜不影响再植牙就位。对于即刻牙再植，应用PRF尚不能改善再植牙牙周膜愈合;对于延迟再植牙，应用PRF能够减少炎症性吸收及替代性吸收的发生。应用PRF能够调节再植牙根面OC表达。

目录

声明

缩略语表

摘要

前言

实验一：富血小板纤维蛋白(PRF)膜的制备及组织学观察

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

实验二：PRF膜用于大鼠全脱位牙再植的组织学观察

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

实验三：PRF膜对再植牙牙周OC表达的影响

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

全文小结

参考文献

文献综述 全脱位牙再植后牙周牙髓组织愈合情况的研究进展

攻读学位期间发表文章情况

致谢