抗乙酰胆碱受体抗体的补体结合功能去除

摘要

目的：
　　制备出无补体结合功能的免疫球蛋白样抗乙酰胆碱受体抗体，用于重症肌无力的特异性免疫治疗。
　　方法：
　　应用定点突变技术，将致病性抗乙酰胆碱受体抗体IgG637的重链 CH2区的第322位氨基酸进行 K322A突变，获得的突变型抗体IgG637/K322A基因经转化大肠杆菌XL1-Blue进行增殖，测序证实突变序列正确后，转染哺乳类细胞CHO-k1进行表达，表达产物经酶联免疫吸附试验检测与补体C1q的结合活性。
　　结果：
　　突变型抗乙酰胆碱受体抗体 IgG637/K322A不能与补体 C1q结合，而对照抗体IgG637可以与其结合。
　　结论：
　　经定点突变，已经成功的获得了去除了补体结合功能的抗乙酰胆碱受体抗体。这为下一步制备具有对重症肌无力治疗作用的半寿期较长的免疫球蛋白样抗体准备了材料。

目录

第一章 前言

第二章 实验材料

2.1 实验仪器

2.2 实验试剂

第三章 实验方法

3.1 pIgG1-637的构建

3.2 IgG637重链K322A的PCR定点突变

3.3转化大肠杆菌XL1-Blue

3.4载体pIgG1-637/K322A在哺乳类细胞的表达

3.5突变抗体IgG637/K322A的补体结合性测定

第四章 结果

第五章 讨论

结论

参考文献

致谢

综述:单链抗体及其在医药学方面的应用