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前庭性血压调控中MVN和RVLM与脊髓之间的功能联系

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第一章 前 言

第二章 材料与方法

2.1 材料

2.2 实验方法

2.3 数据处理和统计学分析

第三章 实验结果

3.1核团给药部位鉴定

3.2 MVN区Glu离子型受体对急性低血压兴奋脊髓灰质侧角神经元的影响

3.3 MVN中Glu离子型受体对血液中肾上腺素含量的影响

3.4 RVLM区Glu离子型受体对急性低血压兴奋脊髓灰质侧角神经元的影响

3.5 RVLM中Glu受体对血液中肾上腺素和去甲肾上腺含量的影响

第四章 讨 论

第五章 结论

参考文献

文献综述:动脉血压调控研究进展

致谢

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攻读学位期间获奖情况

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摘要

目的:许多研究已经证实,前庭神经核有神经纤维直接向脑干内调节心血管功能的自主神经核团投射,同时本实验室的前期研究已经证明,硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)诱发的急性低血压时,机体内存在由外周前庭器官-前庭内侧核、前庭神经核-孤束核、孤束核-延髓头端腹外侧区的途径参与继发性的血压调节过程。但是,在这些途径中是否有脊髓和肾上腺髓质的参与,尤其是前庭神经核与脊髓、延髓头端腹外侧区与脊髓之至肾上腺髓质的功能联系尚无研究报道,更无在这一联系中谷氨酸的离子型受体AMPA和NMDA的作用研究。本文在去除压力感受器的情况下,观察了前庭神经内侧核与脊髓、延髓头端腹外侧区与脊髓的功能联系及其与肾上腺髓质的关系,并初步探讨了谷氨酸的部分离子型受体在这一联系中的作用。
  方法:首先将36只SD雄性大鼠进行颈动脉窦和主动脉弓压力感受器去除手术,利用多道生理记录仪观察动物血压压力感受性反射敏感性,待确定手术成功后,分为阻断剂和激动剂组。阻断剂组又分为对照组、MK-801组和CNQX组,激动剂组又分为对照组、NMDA组和 AMPA组,每组6只。利用微量泵以1μl/min流速,分别向前庭神经内侧核和延髓头端腹外侧区注射ACSF、MK801、CNQX、NMDA、CNQX。其中阻断剂组MK-801和CNQX的剂量是200μmol/L,激动剂组的NMDA、AMPA的剂量为100μmol/L,对照组均注射人工脑脊液(ACSF)。核团给药后10min后,阻断剂组静脉注射SNP诱发急性低血压,而激动剂组则不诱发低血压。然后用促凝管心脏取血后离心取血清,用ELASA方法测定肾上腺素或去甲肾上腺的含量,取脊髓T5段进行冰冻切片(25μm)进行免疫组化染色和蛋白印迹分析法,观察T5段脊髓灰质侧角神经元内c-Fos蛋白和p-ERK1/2蛋白的表达情况。
  结果:⑴MVN区域注射Glu受体阻断剂CNQX或MK-801后,再诱发急性低血压,T5段脊髓灰质侧角区 c-Fos、p-ERK1/2蛋白表达和血清中肾上腺素的浓度明显少于对照组(P<0.05,n=6)。⑵MVN区域注射Glu受体激动剂NMDA或AMPA,则使T5段脊髓灰质侧角区c-Fos、p-ERK1/2蛋白表达和血清中肾上腺素的浓度明显增加,与对照组相比具有统计学意义。⑶RVLM区域注射Glu受体阻断剂CNQX和MK-801后,再诱发急性低血压使T5段脊髓灰质侧角内c-Fos、p-ERK1/2蛋白表达和血清中肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度明显减少,且与对照组相比较有显著性差异。⑷RVLM区域注射Glu受体激动剂NMDA或AMPA后,T5段脊髓灰质侧角区c-Fos、p-ERK1/2蛋白表达和血清中肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度比对照组明显增加。
  结论:①MVN和RVLM可能通过脊髓和肾上腺髓质,参与前庭性血压调控机制;②MVN和RVLM区的谷氨酸NMDA和AMPA受体,参与前庭性血压调控机制。

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