几种名贵洋兰转基因受体系统的建立及遗传转化

摘要

研究了蝴蝶兰、大花蕙兰和文心兰转基因受体系统的建立和抗病基因转化，结果表明：　　(1)由蝴蝶兰种子播种可获得大量无菌材料，在Hyponex培养基上，蔗糖浓度为25g/L时，种子萌发情况最好；也可从花梗节芽诱导营养芽从而建立快繁无菌体系，营养芽增殖的最佳激素组合为6-BA7.5mg/L+NAA1.0mg/L；在6-BA10.0mg/L+NAA1.0mg/L的激素组合下，从无菌苗的叶片诱导类原球体的诱导率最高可达87.0﹪，1/2MS和Hyponex基本培养基对类原球体的增殖和分化效果较好；蔗糖浓度对类原球茎分化成苗的影响可用二次曲线拟合，在浓度为20g/L时，分化率达最高。　　(2)基因型对大花蕙兰丛生芽增殖有显著影响，差异的显著性在不同基因型间达不同水平，离散性和集中性具有分组特性；影响大花蕙兰丛生芽增殖系数差异的主要因子是细胞分裂素的浓度水平，二者关系可用二次式模型拟合；激素对愈伤组织的诱导和体胚发生的影响达极显著差异，2，4-D浓度升高，愈伤组织诱导率增加，但高于2.0mg/L时，外植体褐化死亡，KT是体胚发生的关键因子，其作用受到2，4-D的抑制和低浓度NAA的促进；石蜡切片观察表明，大花蕙兰体胚发生经过球形胚、鱼雷胚，最后发育成子叶胚，形成具有完整植株特性的原球茎。　　(3)以文心兰花梗为材料，在6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的1/2MS培养基上，花梗营养芽的诱导率可达60﹪；花梗营养芽的茎段，在6-BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L的培养基上，愈伤组织诱导率最高可达78﹪，诱导率受[NAA]/[6-BA]浓度比和光照强度的影响；在6-BA0.4mg/L+NAA0.2mg/L的激素组合下，从愈伤组织分化出幼苗的形成率和商品化率可达到最佳效果，中、低无机盐浓度且全量的基本培养基较利于幼苗分化；当分化形成的幼苗株高为1～2cm时，可进一步状苗生根，生根苗在适宜条件下移栽，成活率可达99﹪以上。

目录

文摘

英文文摘

致谢

上篇文献综述

第一章兰花育种技术研究及应用

1.杂交育种

2.诱变育种

3.体细胞杂交

4.基因工程育种

5.人工种子生产

6.兰花杂交种登记和品种评审制度

第二章兰花快繁技术的研究及应用进展

1.兰花种子的无菌播种技术

2.组织培养技术

3.兰花细胞工程技术

4.兰花产业化的现状与未来

第三章兰花主要病害调查

1.常见真菌性病害

2.常见细菌性病害

3.常见病毒性病害

第四章农杆菌介导单子叶植物基因转化

1.农杆菌对单子叶植物转化

2.影响农杆菌转化单子叶植物的因素

3.实现农杆菌对单子叶植物转化的途径

下篇研究报告

第五章蝴蝶兰（Phalaenopsis）离体叶片诱导植株再生体系的建立

1.前言

2.材料与方法

3.结果与分析

4.讨论

第六章大花蕙兰(Cymbidium)体细胞胚胎发生和植株再生

1.前言

2.材料与方法

3.结果与分析

4.讨论

第七章文心兰(Oncidium)愈伤组织诱导及其分化系统的建立

1.前言

2.材料与方法

3.结果与分析

4.讨论

第八章蝴蝶兰(Phalaenopsis)、大花蕙兰(Cymbidium)和文心兰(Oncidium)对抗生素的敏感性反应

1.材料与方法

2.结果与分析

3.结果与讨论

第九章农杆菌介导双价抗病基因转化蝴蝶兰（Phalaenopsis）

1.前言

2.材料与方法

3.结果与分析

4.讨论

第十章农杆菌介导pBin35SGAFP-NP1转化大花蕙兰和文心兰及pBin35S-GFP表达载体的构建

1.前言

2.材料与方法

3.结果与分析

4.讨论

第十一章结论与讨论

1.植株再生系统的建立

2.基因转化条件的优化及转抗病基因植株的获得

3.研究的创新性意义及存在的问题

参考文献(Reference)

附录：作者简介