墨西哥落羽杉组织培养的研究

摘要

该研究以墨西哥落羽杉为对象,进行了体细胞胚胎发生和植株再生、器官发生和植株再生、试管无性系快速繁殖等方面的研究,主要结果如下:1.以墨西哥落羽杉(Taxodium mucronatum)种子萌发后的下胚轴和子叶为外植体,进行墨西哥落羽杉直接体细胞胚胎发生的研究.结果表明:子叶外植体未能诱导出体细胞胚,与子叶相比,下胚轴更有利于体细胞胚胎的发生,但下胚轴培养时间的长短也直接影响体细胞胚胎发生频率.取种子萌发、子叶展开一周后的下胚轴在DCR+BA2.0mg/l+IBA0.1 mg/l的培养基上直接体细胞胚发生频率可达24.5％.诱导出的体细胞胚及时转入不添加任何激素的DCR基本培养基中以促进其萌发.2.以墨西哥落羽杉种子萌发后的下胚轴和子叶为外植体,进行器官发生的研究.结果表明:子叶未能诱导产生不定芽.下胚轴在DCR+BA2.0mg/l+IBA0.1 mg/l+TDZ0.01 mg/l的培养基上不定芽诱导频率为58.5％,低浓度的TDZ与BA配合使用有利于下胚轴不定芽的诱导与分化.诱导出的不定芽继代在不添加任何激素的DCR基本培养基中伸长培养,在不添加任何激素的1/2DCR基本培养基中进行生根诱导,生根诱导率可达70％以上.3.通过幼苗和腋芽两种不同外植体来建立墨西哥落羽杉试管无性系.结果表明:幼苗在DCR+BA0.5mg/l+IBA0.2mg/l培养基上诱导分化效果最好,分化频率80％以上,平均每个外植体产芽2-5个.诱导出针叶基潜伏芽后,转入DCR+500mg/1Gln中伸长生长.Gln能够促进针叶基潜伏芽的伸长生长.试管苗在3/4DCR+0.05％AC培养基中生根效果最好,生根率可达78％.选择节间较长,生长旺盛,茎干较粗壮的小苗诱导生根过程往往容易完成.根长达2-4cm时,开瓶炼苗3-7天后即可进行移栽.4.DCR+IBA0.05mg/l+BA0.025mg/l培养基最有利于茎段腋芽的抽梢与伸长生长.腋芽针叶基潜伏芽的诱导以DCR+BA0.3mg/l+NAA0.1mg/l+Gln500mg/l培养基为最佳,加入Gln可明显提高腋芽针叶基潜伏芽的诱导率.TDZ不适宜墨西哥落羽杉腋芽针叶基潜伏芽的诱导.针叶基潜伏芽在DCR+0.1％AC的培养基中伸长效果最好,继代2-3次后即可剪切较长的芽用于生根.以腋芽针叶基潜伏芽增殖方式建立起来的试管无性系诱导生根困难,生根频率较低.上述研究为发展墨西哥落羽杉器官发生、体细胞胚胎发生诱导技术、以及墨西哥落羽杉无性系的快速繁殖,进而开展遗传转化研究奠定了良好的基础.

目录

文摘

英文文摘

致谢

一、文献综述

1.植物组织培养在林业生产中的应用

1.1林木品种改良及良种繁育

1.2快速繁殖大量种苗

1.3.种质资源的保存

1.4.次生代谢物的生产

2.针叶树种组织培养研究现状及其技术要点

2.1体细胞胚胎发生及植株再生

2.2器官发生和植株再生

2.3腋芽生长、增殖与植株再生

3.墨西哥落羽杉种质资源及其研究现状

3.1墨西哥落羽杉概况

3.2墨西哥落羽杉研究现状

3.3墨西哥落羽杉组织培养的意义

二、墨西哥落羽杉组织培养的研究

1.墨西哥落羽杉体细胞胚胎发生

1.1材料与方法

1.2结果与分析

1.3讨论

2.墨西哥落羽杉器官发生

2.1材料与方法

2.2结果与分析

2.3讨论

3.墨西哥落羽杉试管无性系的建立

3.1以种子萌发幼苗为起始材料的试管无性系的建立

3.2以茎段腋芽为起始材料的试管无性系的建立

三、主要结论与进一步研究展望

1主要结论

1.1体细胞胚胎发生及植株再生

1.2器官发生及植株再生

1.3试管无性系快速繁殖

2.问题讨论

2.1“有效芽”与“无效芽”

2.2“亲体效应”

3进一步研究展望

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参考文献