溶酶体膜胆固醇丢失影响溶酶体的钾离子和质子通透性

摘要

胆固醇是溶酶体膜的基本组成成份。本论文重点在于研究溶酶体膜胆固醇的丢失是否影响溶酶体膜溶酶体的钾离子和质子通透性，进而影响溶酶体的稳定性。 通过测定自由β氨基己糖苷酶的活性，溶酶体膜电位变化，膜流动性，溶酶体膜内部PH值变化以及溶酶体质子漏，经过β-甲基环状糊精处理减少溶酶体膜胆固醇含量，发现钾离子和质子通透性增强，同时膜流动性也增大。而进一步的研究发现钾离子进入溶酶体是通过钾氢交换的方式。从而造成了溶酶体膜的渗透不稳定性，影响溶酶体的完整性。此外研究还发现β-甲基环状糊精也造成了溶酶体的质子漏和其内部的pH值升高。 上述的这些结论揭示了膜胆固醇在控制溶酶体的钾离子和质子通透稳定性上发挥了重要的作用。溶酶体膜胆固醇的丢失会造成细胞内部酸化并影响细胞的稳定性。

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引 言

1.文献综述

1.1溶酶体的结构与功能

1.2溶酶体膜的通透性

1.2.1溶酶体膜的通透性与完整性的关系

1.2.2溶酶体膜对不同物质的通透性

1.3溶酶体的完整性

1.3.1影响溶酶体膜完整性的因素

1.3.2判断离体溶酶体的完整性

1.3.3判断细胞内溶酶体的完整性

1.3.4溶酶体的完整性对生物体的影响

1.4胆固醇的生物功能

1.4.1胆固醇的分子结构和细胞功能

1.4.2溶酶体膜胆固醇的功能

2材料与方法

2.1试剂

2.2溶酶体制备

2.3溶酶体膜的制备及膜蛋白含量测定

2.4 MBCD处理溶酶体

2.5溶酶体完整性分析

2.6溶酶体钾离子通透性的测定

2.7溶酶体膜电位的测定

2.8溶酶体质子漏的测定

2.9溶酶体内PH的测定

2.10测定溶酶体膜的各向异性(ANISOTROPY)

2.11测定溶酶体膜胆固醇

3结果及分析

3.1对钾离子通透性的影响

3.2 MBCD对质子通透性的影响

3.3钾离子通透性增大的机制研究

4讨论

结论

参考文献

致 谢