慢性心衰状态下丘脑室旁核GABA和GABA受体介导的交感传出抑制作用发生钝化

摘要

下丘脑室旁核与交感传出神经的紧张性调节作用有关。室旁核γ-氨基丁酸(GABA)能神经元调节功能的失衡可能导致心衰状态下交感神经系统活动增强。证实慢性心衰大鼠下丘脑室旁核(PVN)γ-氨基丁酸(GABA)A和GABAB受体介导的紧张性抑制作用，比较观察慢性心衰状态下室旁核内GABAA和GABAB受体在调节交感缩血管紧张度发挥的作用。确证以下假说，即心衰状态下，室旁核内GABAA受体与GABAB受体介导的对交感传出神经紧张性抑制性作用的减弱机制可能与中枢PVN内GABAA受体与GABAB受体tuRNA表达量的下调有关。以冠状动脉结扎法诱导大鼠心衰模型。使用α-氯醛糖和乌拉坦麻醉大鼠，于正常和心衰大鼠室旁核分别微量注射GABA-A受体激动剂(蝇蕈醇)和阻断剂(比扣扣灵)或GABA-B受体激动剂(CGP35348)和阻断剂(巴氯芬)，观察其对大鼠心率、血压、肾交感神经放电的影响。分子生物学手段(RT-PCR)：检测假手术组、心衰组大鼠室旁核内GABAA受体与GABAB受体mRNA表达量表达水平。目的是确定心衰过程交感神经激动的增强是否与中枢PVN内GABAA受体α1亚基与GABAB受体1a和1b亚型mRNA表达量水平的下调有关。通过对大鼠假手术组和心衰组大鼠血流动力学指标的测定，结果发现心衰组大鼠心率(HR)与对照组相比无显著差异；心衰组的动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP)、左室收缩压(INSP)和左心室内压最大收缩舒张速率(+dp/dt)明显低于假手术组：而心衰组大鼠左室舒张末期压(INEDP)却明显高于假手术组；通过对假手术组、心衰组大鼠心脏标本进行病理分析，发现心衰组大鼠心脏重量、心脏重量与体重的比值与对照组相比明显增加；而左心室心肌梗死面积(MIS)与对照组相比明显增加，心梗面积在34％-42％之间或大于30％；而心衰组左心室壁最小厚度却明显低于对照组：通过制备大鼠心肌组织病理学切片，发现心衰组大鼠左心室发生了透壁性损伤。以上结果提示心衰组大鼠的心脏收缩功能减退、心肌肥厚并伴有心肌坏死和透壁性损伤，故认为心衰模型构建成功。通过制备大鼠脑组织冰冻切片，检验药物干预实验中，各种药物的微量注射位点位于室旁核范围内。在正常和心衰大鼠室旁核内微量注射GABA-A受体阻断剂甲碘荷包牡丹碱(Bicuculline methiodide)都导致心率、血压的升高和肾交感神经放电的显著增强，但是，在心衰组增强幅度与正常对照组比显著减小。分别在正常和心衰大鼠室旁核微量注射GABA-A受体激动剂蝇蕈醇(Musimol)都导致心率、血压下降和肾交感神经放电的减弱，但是心衰组的减弱幅度与正常对照组比显著减小。在正常和心衰大鼠室旁核内微量注射GABA-B受体阻断剂(CGP35348)都导致心率、血压的升高和肾交感神经放电的显著增强，但是，在心衰组增强幅度与正常对照组比显著减小。分别在正常和心衰大鼠室旁核微量注射GABA-B受体激动剂巴氯芬(Balcofen)都导致心率、血压下降和肾交感神经放电的减弱，但是心衰组的减弱幅度与正常对照组比显著减小。RT-PCR结果显示心衰组大鼠室旁核内GABAA受体α1亚基与GABAB受体1a和1b亚型mRNA表达量与假手术组相比发生下调。GABAA和GABAB受体参与介导室旁核的紧张性抑制作用，心衰大鼠室旁核GABAA和GABAB受体参与介导的紧张性抑制作用明显低于正常大鼠。结果提示慢性心衰状态下丘脑室旁核GABAA和GABAB受体介导的交感传出抑制作用发生钝化，可能与慢性心衰状态下交感活性增强有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英文缩写

声明

引 言

1心力衰竭与外周组织之间关系的研究进展

2心衰与脑之间关系的研究进展

2.1神经体液调节改变与心衰的关系

2.2下丘脑室旁核功能的改变与心衰的关系

2.3前脑与心衰病理变化的关系

2.4前脑内肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)与心衰的关系

2.5脑内细胞因子与心衰的关系

2.6交感神经驱动与心衰的关系

3小结

材料与方法

1实验材料

1.1实验动物

1.2主要药品与试剂

1.3实验器材

2实验方法

2.1心衰动物模型的建立

2.2血压和心率的记录

2.3肾交感神经传出放电活动的引导与记录

2.4室旁核的脑立体定位和微量注射

2.5实验分组、药物注射及结果记录的详细方案

2.6室旁核的脑立体定位组织学鉴定

2.7 RT-PCR检测假手术组、心衰组大鼠室旁核内GABAA受体α1亚基与GABAB受体1a和1b亚型mRNA表达量

3统计学处理方法

结 果

1心衰大鼠动物模型的建立

2室旁核微注射位点的脑组织学鉴定结果

3在正常和心衰大鼠室旁核内微量注射GABA-A受体阻断剂甲碘荷包牡丹碱(Bicuicuculline methiodide)对心率、血压和肾交感神经放电的影响

4在正常和心衰大鼠室旁核微量注射GABA-A受体激动剂蝇蕈醇(Musimol)对心率、血压和肾交感神经放电的影响

5在正常和心衰大鼠室旁核内微量注射GABA-B受体阻断剂(CGP35348)对心率、血压的升高和肾交感神经放电的影响

6在正常和心衰大鼠室旁核微量注射GABA-B受体激动剂巴氯芬(Balcofen)对心率、血压和肾交感神经放电的影响

7 RT-PCR检测假手术组、心衰组大鼠室旁核内GABAA受体α1亚基与GABAB受体1a和1b亚型MRNA表达量

讨论

1 GABAA和GABAB受体参与介导室旁核的紧张性抑制作用

2心衰大鼠室旁核GABAA和GABAB受体参与介导的紧张性抑制作用明显低于正常大鼠

3展望

结 论

创新点

参考文献

致 谢

在学期间公开发表论文及著作情况