肾病有效标志物——胱抑素C检测方法的建立

摘要

肾脏疾病严重危害人类的健康，给人们带来了生活和经济上负担。肾小球滤过率(Glomerular filtration rate,GFR)是评价肾功能的一个常用指标。胱抑素C(Cystatin C, Cys-C)是衡量GFR的有效标志物。Cys-C常用检测方法存在弊端。因此，建立一种简单、方便、特异地检测Cys-C的方法具有非常重要的意义。
　　本研究通过噬菌体表面展示技术获得Cys-C的亲和配体。经过三轮淘洗获得目标序列：Q-V-N-G-L-G-E-R-S-Q-Q-M。用人工固相合成方法标记 FITC以制得荧光探针FITC-Acp-Q-V-N-G-L-G-E-R-S-Q-Q-M，通过HPLC和MS进行测定，分子量与理论值相符。当Cys-C浓度在0.039μg/mL-2.5μg/mL时，检测的荧光强度与Cys-C浓度符合线性方程：y=182.12x+33.842,R2=0.9990；当Cys-C的浓度在2.5μg/mL-160μg/mL时，检测的荧光强度与Cys-C浓度符合曲线方程：y=599.3ln(x)-119.79，R2=0.9964。探针的荧光强度值与Cys-C浓度总体呈正相关。可为肾病早期检测提供一种有效的新方法。

目录

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英文缩写符号

第一章 绪 论

1.1 前 言

1.2 胱抑素C

1.3 实验技术

1.4 研究内容和技术路线

第二章 Cys-C特异性亲和配体的筛选

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 实验结果与讨论

2.4 小结

第三章 Cys-C荧光探针的制备

3.1 实验材料

3.2 实验方法

3.3 实验结果与讨论

3.4 小结

第四章 Cys-C的检测方法建立及应用

4.1 实验材料

4.2 实验方法

4.3 实验结果与讨论

4.4 小结

结论

致谢

参考文献

附录