声明
摘要
1绪论
1.3类胡萝卜素的生物合成
1.4类胡萝卜素氧化裂解的主要途径
1.5.1 CCD酶的特性
1.5.2 CCDs对植物香气和颜色的影响
1.6本课题的研究目的与意义
2桂花类胡萝卜素裂解关键基因OfCCD1的克隆与生物信息学分析
2.1材料与方法
2.1.1实验材料
2.1.2实验试剂
2.1.3总RNA提取及cDNA链合成
2.1.4 OfCCD1基因的克隆
2.1.5 OfCCD1序列分析
2.2结果与分析
2.2.1桂花总RNA的提取
2.2.2 OfCCD1基因的克隆
2.2.3 OfCCD1基因和蛋白序列的分析
2.2.4蛋白质结构域分析
2.2.5蛋白质二级结构分析
2.2.6蛋白质三维结构模拟
2.2.7 OfCCD1基因的树状图分析
2.3讨论与小结
3桂花类胡萝卜素氧化裂解关键基因OfCCD1的表达分析
3.1材料与方法
3.1.1实验试剂
3.1.2 OfCCDl表达分析
3.1.3电泳条件
3.1.4数据分析
3.2结果与分析
3.2.2 OfCCD1基因在盛花中期不同时间的表达分析
3.3小结与讨论
4 OfCCD1基因表达载体的构建及遗传转化
4.1材料与方法
4.1.2原核表达载体的构建
4.1.3原核表达的蛋白表达与纯化
4.1.4表达载体构建及检测
4.1.5表达载体转化农杆菌
4.1.6无菌苗的获得
4.1.7转基因植株的获得
4.1.8转基因植株的阳性检测
4.2结果与分析
4.2.1转基因植株统计
4.2.2原核表达载体构建
4.2.3诱导条件的优化
4.2.4重组质粒诱导表达与表达形式鉴定
4.3小结与讨论
5结论与展望
6创新点
参考文献
致谢
攻读学位期间的主要学术成果