胰岛素样生长因子-2对鸡形觉剥夺性近视眼调控作用的研究

摘要

第一章IGF-1、IGF-2及其受体在小鸡FDM眼后极部视网膜-脉络膜中的表达 目的：建立小鸡形觉剥夺性近视(FDM)动物模型，观察FDM眼后极部视网膜-脉络膜胰岛素样生长因子(IGF-1、IGF-2))及受体(IGF-1R，IGF-2R)表达水平的变化，探讨IGF-1、IGF-2及IGF-1R、IGF-2R在FDM发病中的作用。 方法：选取孵化1天的健康白色来亨鸡36只，随机分为2组：右眼遮盖为实验组，遮盖时间为7天、14天、21天，各时间段12只：左眼不遮盖为自身对照组。于实验前及遮盖不同时间段测量屈光度和眼轴长度；用免疫组化及RT-PCR检测后极部视网膜一脉络膜IGF-1、IGF-2及IGF-1R、IGF-2R的表达水平。 结论：形觉剥夺可成功建立鸡近视眼模型，表现为屈光度向近视化发展，眼轴延长。鸡眼后极部视网膜-脉络膜均可见IGF-1、IGF-2及IGF-IR、IGF-2R蛋白质和mRNA水平的表达。形觉剥夺可导致IGF-2和IGF-1R表达水平升高，而对IGF-1和IGF-2R表达水平无影响，提示IGF-2可能通过与IGF-1R结合参与调控近视的发展。 第二章重组人igf-2对小鸡眼球发育及后极部视网膜一脉络膜igf-2mrna表达的调控 目的:小鸡非遮盖眼和fdm眼玻璃体腔注射重组人igf-2,观察rhlgf-2对其屈光度、眼轴长度及内源性igf-2 mrna表达水平的影响,探讨rhlgf-2对小鸡眼球发育的影响及其调控作用与形觉剥夺的关系。 方法:选取孵化1天的白色来亨鸡120只,随机均分为2组:a组为非遮盖组,按不同处理分为al～a5组,每组12只:a<,1>组为空白对照组;a2组为阴性对照组,单眼玻璃体腔注射20ul牛血清白蛋白;a<,3>～a<,5>组为rhlgf-2注射组,浓度分别为lng/20ul、10ng/20ul、100ng/20ul。b组为单眼遮盖组,分为b<,1>～b<,5>组,各组遮盖眼处理同a<,1>～a<,5>组。实验第7天测量遮盖眼屈光度和眼轴长度,并用rt-pcr检测内源性igf-2 mrna的表达水平。 结论:rhlgf-2玻璃体腔注射对非遮盖组的屈光度和眼轴长度无影响;但可使单眼遮盖组近视屈光度增加,眼轴延长,其效应呈浓度依赖性。rhlgf-2可下调两组后极部视网膜一脉络膜内源性IGF-2mRNA的表达水平，效应呈浓度依赖性。以上结论提示rhlGF-2在形觉剥夺存在的条件下可促进FDM的发展。 第三章IGF-2、IGF-1R反义寡核苷酸对小鸡FDM及后极部视网膜一脉络膜IGF-2 mRNA、IGF-1R mRNA表达的抑制作用 目的：小鸡FDM眼玻璃体腔注射IGF-2和IGF-IR的反义寡核苷酸(ASON)，观察其屈光度、眼轴长度以及IGF-2 mRNA、IGF-1R mRNA表达水平的变化，探讨IGF-2、IGF-lRASON对FDM的影响。 方法：选取孵化l天白色来亨鸡120只，行单眼遮盖后随机分为4组：A组(12只)为空白对照组。B组(12只)为阴性对照组，遮盖眼玻璃体腔注射20ul生理盐水。C组(48只)为IGF-2寡核苷酸注射组，均分为C<,l>、C<,2>、C<,3>、C<,4>组，C<,1>组：遮盖眼玻璃体腔注射40ug／20ul的IGF-2正义寡核苷酸(sense oligonucleotides，SON)：C<,2>～C<,4>组：分别注射10ug／20ul、20ug／20ul、40ug／20ul的IGF-2 ASON。D组(48只)为IGF-1R寡核苷酸注射组，均分为D<,l>、D<,2>、D<,3>、D<,4>组，D<,l>组：遮盖眼玻璃体腔注射40ug／20ul的IGF．1R SON；D<,2>～D<,4>组分别注射10ug／20ul、20ug／20ul、40ug／20ul的IGF-1R ASON。于实验第7天测量实验眼的屈光度、眼轴长度，用RT-PCR检测其IGF-2 mRNA、IGF-1R mRNA的表达水平。 结论：玻璃体腔注射IGF-2、IGF-1R ASON可通过下调小鸡FDM眼视网膜-脉络膜IGF-2 mRNA及IGF-1R mRNA的表达，减缓小鸡FDM的发展，证实IGF-2可能通过与IGF-1R结合调控近视的发展。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文对照

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前言

第一章IGF-1、IGF-2及其受体在小鸡FDM眼后极部视网膜－脉络膜中的表达

第二章重组人IGF-2对小鸡眼球发育及后极部视网膜－脉络膜IGF-2 mRNA表达的调控

第三章IGF-2、IGF-1R反义寡核苷酸对小鸡FDM及后极部视网膜－脉络膜IGF-2 mRNA、IGF-1R mRNA表达的抑制作用

结论

参考文献

综述生长因子与实验性近视眼

致谢

在读期间已发表和待发表论文情况