肠源性全身炎症反应综合征中Toll样受体4表达的改变及意义

摘要

为研究Toll样受体4表达改变在肠缺血再灌注损伤及肠源性多器官功能不全中的作用及意义，我们检测了肠缺血再灌注损伤大鼠各重要脏器的Toll样受体4的表达水平，并观测其与全身炎症反应及多器官功能不全的关系，实验分如下两部分进行： 第一章大鼠小肠缺血再灌注损伤后TLR4基因表达的改变及意义 目的：观察大鼠小肠缺血再灌注损伤后小肠组织TLR4的表达及其与炎症因子水平变化的关系。 方法：雄性SD大鼠90只，随机分为正常对照组、假手术组、小肠部分缺血再灌注损伤组。分别于缺血再灌注后6h、12h、24h和48h，检测小肠组织TLR4mRNA的表达，测定门静脉血清中TNF-α、IL-6的水平并进行相关性分析。用免疫组织化学法观察TLR4在小肠组织中的表达和分布。 结果 1.SD大鼠缺血再灌注小肠内TLR4mRNA表达上调，且再灌注12h最强；2.门静脉血清中炎症因子IL-6、TNF-α浓度在各时间点与对照组比较增高，在缺血再灌注24h后达到峰值，与假手术组比较有显著差异(P<0.01)；3.再灌注损伤组门静脉IL-6、TNF-α浓度的增高与小肠TLR4mRNA表达的上调呈正相关(r=0.790，r=0.773)；4.免疫组织化学法显示小肠组织在缺血再灌注损伤后TLR4表达明显增强，且阳性部位主要是小肠粘膜细胞。 第二章小肠缺血再灌注损伤后大鼠多脏器Toll样受体4表达的变化及意义 目的：观察小肠部分缺血再灌注损伤的SD大鼠主要脏器组织(小肠、肺、肝、肾)TLR4表达变化，探讨TLR4在肠源性多器官功能不全发生中的作用。 方法：SD大鼠分为正常对照组、假手术组及实验组(缺血再灌注6h，12h，24h)。建立小肠缺血再灌注模型，观察伤后6h、12h、24h大鼠症状改变及重要器官(小肠、肺、肝、肾)的炎性病理变化，用半定量RT-PCR法分别检测小肠、肺、肝和肾组织中TLR4mRNA表达变化，并行各组大鼠多器官的TLR4的免疫组织化学检查。 结果：缺血再灌注损伤后，大鼠出现全身炎症反应综合症(SIRS)症状，各重要器官有炎性病理改变，各组织TLR4mRNA表达较正常对照组及假手术组均增高。其中以肠道上调最显著，于12h达峰值，升高幅度最大(P<0.05)；肺脏、肝脏及肾TLR4表达均明显上调。 结论： 1.大鼠小肠缺血再灌注损伤后，小肠组织TLR4的表达上调是导致肠粘膜屏障功能下降及系统性炎症反应的重要环节。 2.小肠缺血再灌注损伤后大鼠小肠、肺、肝、肾组织中TLR4表达均升高，小肠升高最明显，在肠源性MODS发病机制中起重要作用，是肠源性MODS发生的机制之一。

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文摘

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论文说明：缩略词索引

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前言

第一章大鼠小肠缺血再灌注损伤后TLR4基因表达的改变及意义

引言

1.1材料

1.1.1实验动物

1.1.2主要试剂

1.1.3主要仪器

1.2方法

1.2.1实验分组

1.2.2大鼠肠I/R模型的制备

1.2.3血标本及小肠组织的采集处理

1.2.4小肠组织TLR4mRNA表达

1.2.5门静脉炎症性因子的测定

1.2.6小肠组织TLR4的免疫组织化学检测

1.2.7数据统计

1.3结果

1.3.1小肠TLR4mRNA表达的变化及规律

1.3.2门静脉血清TNF-α、IL-6浓度变化

1.3.3相关性分析结果

1.3.4免疫组织化学检查

小结(一)

第二章大鼠小肠缺血再灌注后多脏器Toll样受体4表达变化及意义

引言

2.1材料与方法

2.1.1设备与试剂

2.1.2实验分组

2.1.3标本收集

2.1.4观察指标

2.1.5统计学分析

2.2结果

2.2.1大鼠症状、体征变化

2.2.2组织湿干重比值的变化

2.2.3各脏器组织HE染色检查

2.2.4肺、肝、肾组织TLR4mRNA表达水平的变化

2.2.5各脏器组织TLR4mRNA表达水平与W/D比值的相关性分析

2.2.6免疫组织化学检查

小结(二)

讨论

结论及意义

参考文献

综述一：Toll样受体与细菌感染

综述二：胃肠道干细胞

致谢

成果