鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂对SNI模型大鼠痛阈及脊髓背角NMDAR和CGRP表达的影响

摘要

目的：本研究拟采用免疫组织化学方法，观察坐骨神经分支选择性损伤模型(spared nerve injury model，SNI)大鼠脊髓背角N-甲基-D-天冬氨受体(N-methyl-D-aspartate recaptors，NMDAR)和降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide，CGRP)的表达，以及鞘内注射舒芬太尼和蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)抑制剂对SNI模型大鼠痛阈及脊髓背角NMDAR和CGRP表达的影响。 方法：健康雄性SD大鼠54只，体重220-280g，随机分为6组(n=9)。对照组(C组)未手术处理；假手术组(sham组)在大鼠左大腿后外侧依次分开皮肤和肌肉，暴露坐骨神经及其三个分支，然后依次逐层缝合肌肉和皮肤；SNI模型组(SNI组)、舒芬太尼组(Suf组)、选择性PKC抑制剂(Chelerythrine Chloride)组(P组)和舒芬太尼+PKC抑制剂组(SP组)都进行SNI手术操作：暴露坐骨神经及其3个分支，结扎胫神经和腓总神经，并分别在结扎远侧端切断胫神经和腓总神经，保留腓肠神经完整。Suf组、SP组和P组在SNI模型手术后14天内每天分别鞘内注射舒芬太尼1μg、舒芬太尼1μg+PKC抑制剂11 μg、PKC抑制剂11 μg，注射药物容量都为10μl，然后用0.9﹪的生理盐水10μl冲管(总容量为20μl)。C组、sham组和SNI组则在以上的相同时间点分别注入0.9﹪的生理盐水20μl。在手术前1天和手术后14天内，每组均进行疼痛行为学观察。所有组别均在术后第2、7、14天鞘内注射药物后分批取材(每批3只)，用免疫组化法观察大鼠L<,5>节段水平脊髓背角NMDAR和CGRP的表达。 结果：(1)C组和sham组在各时点均无机械性异常疼痛出现，热刺激后爪退缩潜伏时间也均无统计学意义(P>0.05)。(2)SNI组在SNI手术后第1天和第2天出现明显的痛觉过敏(机械性异常疼痛痛阈降低)，并且一直持续到术后第14天，与C组和sham组比较有统计学意义(P<0.01)，但对热刺激的后爪退缩潜伏时间与C组和sham组比较无统计学意义(P>0.05)。(3)与SNI组比较，Suf组和P组在注药后第1、2天测得的机械刺激痛阈提高和热刺激后爪潜伏期延长(P<0.01)，并一直持续到术后第14天，其中Suf组和P组比较差异有统计学意义(P<0.01)；在SNI术后14天内，SP组的机械性刺激痛阈提高程度和热刺激后爪潜伏期延长时间大于Suf组(P<0.01)。 (4)C组和sham组脊髓背角出现少量的NMDAR和CGRP表达，两者相比较在术后第2、7和14天无统计学意义(P>0.05)；SNI组大鼠脊髓背角NMDAR和CGRP免疫阳性产物表达与C组和sham组比较在术后第2、7和14天明显增加(P<0.01)。 (5)Suf组和P组在术后14天内，它们脊髓背角浅层NMDAR和CGRP阳性产物与SNI组比较明显降低，具有统计学意义(P<0.05)，其降低的程度为Suf组>P组；在术后14天内， SP组大鼠脊髓背角NMDAR和CGRP阳性反应产物表达与Suf组相比较降低更明显，具有统计学意义(P<0.05)。 结论：(1)SNI模型可引起大鼠损伤侧肢体痛觉过敏(机械性异常疼痛，但对热刺激不敏感)；鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂对SNI模型大鼠具有明显的抗伤害效应．(2)SN工模型引起大鼠脊髓背角NMDAR和CGRP表达上调．(3)鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂可明显抑制SNI模型引起的脊髓背角NMDAR和CGRP表达的增加。

目录

文摘

英文文摘

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第一章前言

第二章鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂对坐骨神经分支选择性损伤模型(SNI模型)大鼠镇痛效应的观察

2.1材料与方法

2.2结果

第三章鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂SNI模型大鼠脊髓背角NMDAR、CGRP表达的影响

3.1材料与方法

3.2结果

第四章讨论

4.1大鼠SNI模型的建立及疼痛行为学特征

4.2脊髓背角NMDAR、CGRP的激活与SNI模型大鼠神经病理性痛产生与维持的关系

4.3鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂对SNI模型大鼠镇痛效果

4.4鞘内注射舒芬太尼和PKC抑制剂对SNI模型大鼠脊髓背角NMDAR与CGRP表达的影响

第五章结论

附图

参考文献

综述一 坐骨神经分支选择性损伤模型及NMDAR、CGRP与疼痛的关系

综述二 腰麻中不容忽视的并发症：短暂性神经综合症

致谢

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