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类风湿关节炎患者外周血单核细胞HMGB1的分泌机制及沙利度胺对其的影响

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第一章 前 言

第二章材料与方法

2.1检测对象及材料

2.2实验方法

2.3统计分析

第三章实验结果

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述 高迁移率族蛋白-1与类风湿关节炎

致 谢

攻读硕士学位期间发表的文章

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摘要

目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞(peripheral blood monocytes)中高迁移率族蛋白-1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)的释放和细胞内定位及沙利度胺(Thalidomide,商品名:反应停)对其的影响。 方法:RA患者19例及年龄性别匹配的正常对照20例,分别抽取外周静脉血5ml,Ficoll密度梯度离心法分离外周血单核细胞,分别用100ng/mlTNF-α或100ng/mlTNF-α加40 μg/ml沙利度胺处理细胞后,放入在37℃、体积分数为5﹪的CO<,2>培养箱中孵育24小时,收集细胞培养液的上清,Western Blot检测HMGB1的表达;另采用细胞免疫荧光法观察培养的外周血单核细胞中HMGB1的胞内定位。 结果: RA组外周血单核细胞培养液的上清中HMGB1的蛋白水平比健康对照组显著增高(P<0.05);100ng/ml TNF-α加40 μ g/ml沙利度胺处理的RA患者外周血单核细胞培养液的上清中HMGBl的表达较100ng/ml TNF-α刺激的细胞明显下降(P<0.05),100ng/mlTNF-α刺激RA患者的外周血单核细胞24小时后培养液的上清中HMGBl的表达与未加任何刺激因子组比较没有显著差异。RA患者外周血单核细胞中HMGB1主要表达于胞核,100ng/mlTNF-α刺激外周血单核细胞24小时后HMGB1主要表达于胞浆,采用100ng/mlTNF-α加40 μ g/ml沙利度胺处理后HMGB1主要表达于胞核。 结论;RA患者外周血单核细胞在TNF-α刺激下HMGB1从核内移位到胞浆,最后释放到细胞外,沙利度胺能够抑制}tMGBl的核移位和释放。

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