孕妇血浆中游离胎儿DNA的检测及其在产前诊断中的临床应用

摘要

目的：检测孕妇血浆中的游离胎儿DNA，并探讨其在胎儿性别鉴定产前诊断中的可行性，寻找一种非创伤性产前基因诊断的新方法。 方法：用微柱吸附分离法提取34例妊娠13～28周和12例妊娠29～40周的孕妇血浆中的游离胎儿DNA，应用巢式PCR技术扩增其胎儿Y染色体上的胎儿性别决定基因SRY，并用半巢式PCR方法扩增X染色体的FMR1基因上的ATL1特异序列作为内参照基因。 结果：28例孕男胎的孕妇血浆中有26例经巢式PCR扩增出SRY基因。18例孕女胎的孕妇血浆中有17例经巢式PCR只扩增出ATL1基因，有1例扩增出SRY基因。灵敏度和特异度分别为92.9％(26/28)和94.4％(17/18)，准确率93.5％(43/46)。 结论：(1)孕妇外周血游离胎儿DNA可用于胎儿性别鉴定的产前诊断。(2)巢式聚合酶链反应检测母体血浆中游离胎儿DNA的灵敏度高，特异性强和准确率高，作为一种非创伤性产前基因诊断的方法可望应用于临床。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文词汇对照

声明

第一章前言

第二章材料和方法

2.1材料

2.1.1研究对象

2.1.2标本

2.1.3试剂及试剂盒

2.1.4主要仪器设备

2.2方法

2.2.1血浆DNA的提取

2.2.2 DNA的浓度和纯度测定

2.2.3血浆DNA PCR扩增

第三章结果

3.1孕妇血浆DNA的检测结果

3.2 PCR敏感性检测结果

3.3孕妇外周血浆DNA巢式PCR扩增结果

3.4检测结果及评价

3.5SRY基因测序结果

第四章讨论

4.1孕妇血浆中游离fDNA的来源及特点

4.2孕妇血浆游离fDNA的检测影响因素及检测时间的选择

4.3巢式PCR技术的建立及应用

4.4结论与展望

第五章结论

第六章参考文献

第七章综述 孕妇外周血中的fDNA在产前诊断中的研究进展

致谢

攻读学位期间主要的研究成果