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波动性高糖对人脐静脉内皮细胞凋亡及信号分子caspase-3 bax bcl-2表达的影响

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前言

材料

1.材料和仪器

1.1试剂

1.2仪器

方法

2.1人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)的培养和分组

2.2波动性高糖诱导HUVECs凋亡的检测

2.3统计学方法

2.4 Western blot分析caspase-3、bax、bcl-2的蛋白表达

结果

讨论

结论

参考文献

综述 血糖波动对糖尿病及其并发症的研究进展

致谢

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摘要

目的:通过观察波动性高糖对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及相关信号传导分子表达的变化来探讨波动性高糖对血管内皮细胞功能的影响。 方法建立血糖波动模型作用于人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial eells,HUVECs)7天,应用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡形态学变化,Western blot分析caspase-3,bax,bcl-2的蛋白表达。 结果:持续性高糖与波动性高糖均可导致HUVECs出现凋亡的形态学变化。Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率发现持续性高糖组与波动性高糖组凋亡率均较对照组明显升高(P<0.05),且波动性高糖组与持续性高糖组有明显差异(P<0.05)。caspase-3特异性抑制剂组能显著降低波动性高糖导致的凋亡增加(P<0.05)。Western blot分析caspase-3、bax、bcl-2的蛋白表达发现:持续性高糖组与波动性高糖组bcl-2表达均弱于对照组,且波动性高糖组更明显(P<0.05);持续性高糖组与波动性高糖组caspase-3、bax的表达均高于对照组,且波动性高糖组更明显(P<0.05)。 结论波动性高糖与持续性高糖均能诱导HUVECs凋亡。波动性高糖较持续性高糖更能促进HUVECs凋亡,这种促凋亡作用与caspase-3、bax上调,bcl-2下调相关。持续的波动性高糖对HUVECs的促凋亡作用能被caspase-3特异性抑制剂阻断,这种促凋亡作用是通过激活caspase-3的途径实现的。

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