氧化/抗氧化失衡及细胞凋亡在烟雾暴露所致COPD发病机制中的作用

摘要

目的：探讨腺病毒介导GPX基因转染对香烟烟雾提取物(CSE)致血管内皮细胞氧化损伤和凋亡的影响。 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞株(ECV304)，取对数生长期细胞用于实验。予0、30、50、70感染倍数(MOI)的腺病毒连接LacZ(Ad-LacZ)转染ECV304，观察其转染率。予0％、5％、10％CSE干预ECV304 24h及10％CSE干预0、6、12、24h，分别观察其凋亡指数(AI)。将ECV304分为四组培养，分别予0％CSE(空白组)、10％CSE(CSE组)、LacZ+10％CSE(LacZ组)、GPX转染+10％CSE(GPX组)干预。收集各组干预24h后细胞爬片及上清液，硫代戊巴比妥酸法测上清液MDA浓度，黄嘌呤氧化酶法测SOD活力，TUNEL法检测细胞AI。 结果： 1.70MOI的Ad-LacZ转染率高达(93.3±2.9)％。 2.10％CSE干预ECV304 24h后，其AI高于0％及5％CSE干预组，差异有统计学意义(p均<0.05)。10％CSE干预ECV304 24h后，其AI高于0h、6h和12h组，差异有统计学意义(p均<0.05)。 3.10％CSE干预ECV304 24h后，与空白组比较，其上清液中MDA浓度增加，SOD活力降低，且AI增加，差异有统计学意义(p均<0.05)。 4.腺病毒介导的GPX基因转染后的ECV304，经10％CSE干预24h后，与CSE组及LacZ组比较，其上清液中MDA浓度降低，SOD活力增加，AI降低，差异有统计学意义(p均<0.05)。 5.所有四组细胞培养上清液中MDA浓度与AI呈正相关(r=0.913，p<0.05)，SOD活力与AI呈负相关(r=0.660，p<0.05)。 结论： 1.CSE能导致内皮细胞氧化/抗氧化失衡及凋亡，其致凋亡作用呈时间及浓度依赖性。 2.腺病毒介导GPX基因转染可以部分抑制CSE致内皮细胞氧化/抗氧化失衡及凋亡作用。 3.ECV304氧化/抗氧化失衡与凋亡程度相关。

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第一章腺病毒介导GPX基因转染对香烟烟雾提取物所致血管内皮细胞氧化/抗氧化失衡及凋亡的影响

1.1前言

1.2材料与方法

1.3结果

1.4讨论

1.5结论

1.6参考文献

第二章烟雾暴露所致大鼠慢性阻塞性肺疾病模型中肺泡间隔细胞凋亡及N-乙酰半胱氨酸干预的影响

2.1 前言

2.2材料与方法

2.3结果

2.4讨论

2.5结论

2.6参考文献

综述慢性阻塞性肺疾病中氧化应激与内皮细胞凋亡的关系

致谢

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