fMRI用于伤害性刺激加工网络的可视化研究

摘要

本研究通过比较四种不同麻醉药物腹腔注射，对比观察麻醉效果及血流动力学、血气变化，探讨适合本研究的最佳腹腔注射麻醉药物；调试并建立大鼠全脑的fMRI扫描序列参数、鼠脑空间标准化的方法：运用fMRI脑功能成像技术观察在重复的伤害性电刺激下，中枢伤害性刺激加工网络的激活变化特点，为连续、动态的监测伤害性刺激加工网络提供方法学上的支持并奠定前期的试验基础，同时也为全麻药物、镇痛药物中枢效应的可视化监测提供前期方法学上的探索。 第一部分不同全麻药物腹腔注射麻醉效果及血流动力学、血气变化 目的：比较四种麻醉药物腹腔注射麻醉效果及血流动力学、血气变化，确定适用本研究的最佳麻醉药物。 方法：随机表法将SD大鼠分为4组，每组12只。A组大鼠以丙泊酚腹腔注射麻醉，剂量80mg/kg；B组以氯胺酮腹腔注射麻醉，剂量75mg/kg；C组以2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剂量40mg/kg；D组大鼠以10％水合氯醛腹腔注射麻醉，剂量300mg/kg。行鼠尾连续伤害性电刺激，刺激参数：脉冲宽度300gs，恒定电流3.8mA(产生伤害性刺激电流)，刺激频率3Hz。观察在麻醉后10min、刺激后15min、30min、清醒后5min记录体温、呼吸、平均动脉压、心率，经股动脉抽血0.3ml检测pH、PaO2、PaCO2，观察麻醉后、电刺激期间的呼吸、心率、MAP及血气的改变。 结果： 1.四组大鼠麻醉前后体温均维持在37℃-38℃之间。A组呼吸频率在刺激后15min明显低于清醒后呼吸频率；C组、D组呼吸频率在麻醉后10min，均低于其他各时间点的呼吸频率；B组大鼠各时间点的呼吸频率稳定，差异无统计学意义。A、C、D组大鼠麻醉后10min HR明显低于清醒后心率；B组麻醉后及刺激期间心率明显高于清醒后心率。A、C、D组麻醉后10min的MAP明显低于刺激后15min、刺激后30min、清醒后30min的MAP；B组麻醉后及刺激期间MAP明显高于清醒后MAP。 2.各组血pH值在各时间点均无明显变化，差异无统计学意义。A、C、D组的PaO2在麻醉后10min较清醒后明显降低，差异有统计学意义。各组PaCO2在各时间点比较，差异无显著性意义。C组麻醉后10min于其他各组同时间点比较PaO2明显降低，PaCO2明显增高。 3.D组的起效时间为(3.56±1.01)min，明显较A、B、C组起效时间短，差异有统计学意义；C组的起效时间明显较A组和B组起效时间短，差异有统计学意义。D组的苏醒时间为(76.54±15.48)min，明显长于A、B、C组，差异有统计学意义；C组的苏醒时间明显长于A组和B组。 结论：四种麻醉药物腹腔注射，均安全有效，大鼠的HR、MAP、血气分析均在正常范围。10％水合氯醛300mg/kg腹腔注射麻醉效果确切，麻醉维持时间最长，麻醉期间呼吸、循环、血气分析结果稳定，是大鼠磁共振扫描的很好的麻醉方法。 第二部分 fMRI用于伤害性刺激加工网络的可视化研究 目的：本研究拟采用连续的fMRI成像方法，探讨在全麻状态不同麻醉间期伤害性电刺激时中枢加工网络的激活规律。 方法：根据经皮电刺激的部位将SD大鼠随机分为两组，T组刺激鼠尾，LF组刺激左前爪。10％水合氯醛腹腔注射麻醉后行fMRI脑功能成像。采用组块设计的fMRI试验方法，每次fMRI成像共扫描110个全脑图象，组成5个Block，每次扫描时间3分55秒。电刺激方由有静息和刺激交替进行，即：静息30个scan，刺激10个scan，静息30个scan，刺激10个scan，静息30个scan。每次扫描结束后，间歇5min，行下一次扫描，刺激方式相同，重复扫描4个循环。采用SPM统计软件行功能像分析处理，比较不同麻醉间期伤害性刺激中枢处理网络的激活情况。 结果： 1各组试验前后HR、MAP、血气的变化 2组试验大鼠均顺利完成试验，实验过程麻醉平稳，连续4个循环的伤害性刺激头动均在可以控制的范围之内。2组试验前HR、MAP、pH、PaO2、PaCO2均处于同一水平，试验结束时2组的HR、MAP均明显高于试验前，差异有统计学意义。2组试验前后的pH、PaO2、PaCO2均在正常范围，差异无统计学意义。表明2组MRI扫描期间生理指标处于稳定状态，大鼠脑血流的灌注均在同一水平，试验数据具有可比性。 2不同麻醉间期鼠尾、左前爪伤害性刺激脑中枢激活情况 本研究表明，在不同的麻醉间期，对大鼠尾、左前爪行伤害性电刺激，脑中枢的激活均不完全一致。SPM统计参数图在阈值0.005水平，伤害性电刺激在中枢激活的主要脑区包括：初级感觉皮质、次级感觉皮质、运动皮质、中脑、纹状体、视觉皮质、前扣带回、后扣带回皮质、丘脑、海马、杏仁核、伏膈核、桥脑、延髓、下丘、小脑。 32组不同时间段各脑区激活发生率及激活脑区数目比较 本研究表明，2组不同时间段的各脑区激活的发生率不是完全一致的，广义混合线性模型统计学分析可以得到：两组Cg、Cpu、Hip、S II、Th在A时间段的激活率明显高于D时间段，差异有统计学意义(P<0.05)；T组AN、Cerebellum在A时间段的激活率明显高于D时间段，差异有统计学意义(P<0.05)；LF组VC的激活率在A时间段的激活率明显高于D时间段，差异有统计学意义(P<0.05)；LF组Th的激活率在A时间段的激活率明显高于C时间段，差异有统计学意义(P<0.05)。广义混合线性模型统计学分析两组不同时间段激活数目情况：两组D时间段的总的激活数目明显低于A、B、C时间段，差异有统计学意义；两组C时间段总的激活数目明显低于A、B时间段，差异有统计学意义(P<0.05)。LF组的D时间段的激活数目明显低于同组A、B、C时间段，差异有统计学意义(P<0.05)；LF组的C时间段的激活数目明显低于同组A、B时间段，差异有统计学意义(P<0.05)；LF组的B时间段的激活数目明显低于同组A时间段，差异有统计学意义(P<0.05)。T组的D时间段的激活数目明显低于同组A、B、C时间段，差异有统计学意义(P<0.05)。 42组不同麻醉间期fMRI图像的组分析结果 SPM组分析结果：T组在不同麻醉间期均存在右侧S I、S II、后扣带回皮质(RSG)、杏仁核(AN)的激活，其中在A时间段还可以见到右侧腹后外侧丘脑核(ventral posterolateral thalamic nucleus，VPL)的激活；LF组在不同麻醉间期均存在伏膈核(AcASH)、右侧S I、右侧腹后外侧丘脑核(ventral posterolateral thalamic nucleus，VPL)及后扣带回皮质(RSG)的激活；2组大鼠在D时间段各激活脑区的体积在四个时间段中比较最小，提示在连续3个时间段的电刺激后，中枢对电刺激引起的躯体感觉传导通路及加工网络的BOLD信号响应减弱。 52组A、D时间段激活差异比较 本研究运用SPM的减法原则，分析2组A、D时间段激活的差异，在threshhold0.05水平，T组A时间段fMRI激活区减去D时间段tMRI激活区，有差异的激活区为苍白球(ventral pallidum，VP)、左侧S II、海马CA1区(field CAl of the hippocampus，CA1)；LF组A时间段fMRI激活区减去D时间段fMRI激活区，有差异的激活区为基底外侧杏仁核(BLA)、导水管灰质(PAG)、中央杏仁核(CMe)、项盖前核(anterior pretectal nucleus，APtn)。而2组D时间段fMRI激活区减去A时间段fMRI激活区，则基本没有差异的激活。 结论： 不同麻醉间期、不同刺激部位大鼠中枢痛觉处理网络的激活不完全一致。刺激鼠尾以右侧S I、S II、后扣带回皮质(RSG)、杏仁核(AN)的激活为主，刺激左前爪以伏膈核(AcbSH)、右侧S I、右侧腹后外侧丘脑核(ventral posterolateral thalamic nucleus，VPL)及后扣带回皮质(RSG)为主。在伤害性刺激的早期，即有中枢下行抑制系统的激活，这些区域包括：苍白球(ventral pallidum，VP)、左侧S II、海马CA1区(field CAl of the hippocampus，CA1)；基底外侧杏仁核(BLA)、导水管灰质(PAG)、中央杏仁核(CMe)、顶盖前核(anterior pretectal nucleus，APtN)。在连续的经皮电刺激后，中枢伤害性刺激加工网络BOLD信号响应会出现减弱的情况，这可能与中枢的痛觉下行调制系统的抗痛效应有关。 S I、S II、后扣带回皮质(RSG)、杏仁核(AN)及伏膈核(AcbSH)、右侧S I、右侧腹后外侧丘脑核(ventral posterolateral thalamicnucleus，VPL)及后扣带回皮质(RSG)可作为fMRI可视化监测麻醉状态下伤害性加工网络的主要脑区；做为一种为整体、动态的监测全麻状态下中枢伤害性刺激加工网络的可视化监测方法，有很好的开发应用前景。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词

声明

第一章前言

1.1 伤害性刺激中枢加工网络可视化监测及临床价值

1.2 功能磁共振成像(functional changes magnetic resonance imaging，fMRI)原理

1.3伤害性知觉(nociception)与疼痛(Pain)

1.4伤害性刺激传导的外周机制和脊髓机制

1.5大脑中枢对伤害性刺激的加工网络—疼痛矩阵(Pain Matrix)

1.6小动物fMRI脑功能成像进展

1.7本研究关注的主要问题

1.8研究目标与技术路线

1.9本研究的创新性

第二章不同麻醉药物腹腔注射麻醉效果及血流动力学、血气变化

1研究目的

2材料与方法

2.1试验动物

2.2试验药物

2.3试验器材

2.4试验方法

3结果

4讨论

4.1小动物磁共振扫描常用麻醉方法

4.2四种麻醉药物腹腔注射麻醉效果比较

5结论

第三章 fMRI用于伤害性刺激加工网络的可视化研究

1研究目的

2技术路线

3材料与方法

3.1试验动物

3.2试验分组

3.3试验药物

3.4试验器材

3.5试验方法

3.6脑功能成像数据处理及统计学分析：

3.7质量控制评价

4结果

4.1各组试验前后HR、MAP、血气的变化

4.2不同麻醉间期大鼠脑中枢激活的变化

5讨论

5.1 鼠脑的标准化

5.2经典大鼠伤害性知觉的传递通路

5.3 中枢伤害性刺激加工网络激活区域解剖与功能联系

5.4 2组不同时间段fMRI激活图像的组分析结果探讨

5.5 2组在第4个时间段脑区激活减弱原因分析

5.6 2组A、D时间段激活差异比较

5.7 fMRI成像技术行躯体感觉通路监测的可行性

5.8麻醉药物对BOLD成像的影响

6结语

参考文献

综述 疼痛脑功能成像技术的研究进展

致谢

攻读博士学位期间发表论文及参加学术会议