异氟烷预处理对心脏换瓣术病人心肌基因表达的影响

摘要

目的:在确定异氟烷预处理能减轻心脏瓣膜置换术(cardiacvalves replacement,CVR)病人术后心肌显微结构、降低血浆基质金属蛋白酶(metrix metalloproteinase,MMP)-9和血管假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)浓度的基础上,应用基因芯片技术,观察异氟烷预处理对CVR病人心肌基因表达的影响,构建相关基因表达改变框架,深入观察异氟烷预处理对CVR病人心肌保护机制,为CVR病人最适麻醉用药提供理论基础。
　　 方法:择期体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)下心脏二尖瓣和主动脉瓣联合瓣膜置换术成年病人,随机分为对照组和试验组。试验组在麻醉诱导后吸入1.1％～1.2％(呼气末浓度)的异氟烷30min,洗脱15 min。对照组不吸入异氟烷,其余麻醉用药同试验组。分别于麻醉诱导后吸入异氟烷前(T0)、主动脉开放30 min(T1)、关胸后(T2)、主动脉开放后6h(T3)、12h(T4)及24h(T5)应用Swan-Gans漂浮导管测心功能;分别于T0、T1、T3、T4和T5经桡动脉取血测血浆MMP-9和vWF浓度;于上腔静脉插管时(主动脉阻断前)和上腔静脉退管时(主动脉开放后)取部分右心耳组织观察其显微结构和检测两组差异表达基因。最后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对基因检测结果进行验证。
　　 结果:和T0比较,试验组和对照组平均动脉压(mean arterial bloodpressure,MABP)在T1～T4时降低(P＜0.05或P＜0.01),肺动脉阻塞压(pulmonary artery obstruction pressure,PAOP)在T2～T5时降低(P＜0.05或P＜0.01),体循环血管阻力(systemic vascular resistance,SVR)在T1～T5降低,左心室心搏做功指数(left ventricular-stroke workindex,LVSWI)、心输出量(cardiac output,CO)和每博输出量(strokevolume,SV)在T1～T5时均升高(P＜0.05或P＜0.01);血浆MMP-9浓度对照组在T1～T4升高(P＜0.01)、试验组在T1升高(P＜0.01);血浆vWF浓度对照组在T1、T4和T5降低(P＜0.05)、试验组在T1～T5降低(P＜0.05或P＜0.01),以上差异均有统计学意义。和对照组比较,试验组PAOP在T5时降低(P＜0.05),LVSWI和CO在T3～T5时升高(P＜0.05或P＜0.01),SV在T4～T5时升高(P＜0.05),血浆MMP-9浓度在T3降低(P＜0.01),vWF浓度在T1及T3降低(P＜0.05),以上差异有统计学意义。光镜和电镜下可见试验组主动脉开放后心肌细胞显微结构损伤轻于对照组。基因芯片共检测出22条2倍及2倍以上差异表达基因。从基因编码的蛋白质细胞分布区域来看,有一半分布在细胞外区或细胞膜上。数量最多的是信号转导基因,共有9条,主要涉及蛋白激酶信号通路。将检测到的2倍及2倍以上差异表达基因从功能上分为以下几类:信号通路和信号转导、免疫功能、内环境稳态、细胞粘附、细胞外基质和细胞骨架、细胞凋亡及增加氧供。实时荧光定量PCR验证了NM007350、NR002196和BC042589三条基因。证实和对照组比较,实验组NM007350表达下调,NR002196和BC042589表达上调,与基因芯片检测结果一致。
　　 结论:1.异氟烷预处理可改善心脏联合瓣膜置换术病人术后24 h心功能;2.异氟烷预处理可降低心脏联合瓣膜置换术病人主动脉开放后6 h内血浆MMP-9和vWF浓度;3.异氟烷预处理可减轻心脏联合瓣膜置换术病人术后心肌细胞显微结构损伤;4.异氟烷预处理对心脏联合瓣膜置换术病人术后心肌基因表达有影响,可能涉及对信号通路和信号转导、免疫功能、内环境稳态、细胞粘附、细胞外基质和细胞骨架、细胞凋亡及增加氧供等基因转录的改变。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英文缩略词索引

前言

第一章 异氟烷预处理对心脏换瓣术病人心功能等指标影响的研究

1、材料与方法

2、统计学处理

3、结果

第二章 异氟烷预处理对心脏换瓣术病人心肌基因表达影响的研究

2.1 材料和方法

2.2 芯片检测步骤

2.3 实验样品质控报告

2.4 芯片检测结果

2.5 数据分析

第三章 利用实时荧光定量PCR对基因的验证

3.1 材料与方法

3.2 试剂及仪器

3.3 实验步骤

3.4 结果

第四章 讨论

4.1 第一章讨论

4.2 关于基因芯片

4.3 检测到的2倍及2倍以上差异表达基因提示的意义

4.4 和已有相关基因研究的横向比较

4.5 其他

4.6 今后研究的方向

4.7 文章不足之处

第五章 结论

参考文献

综述一 异氟烷预处理对缺血再灌注损伤心肌的保护机制

综述二 七氟烷心肌保护研究新进展

致谢

在读期间以第一作者发表的文章、参与的课题和奖励