miRNA-214对胃癌细胞周期和凋亡影响的研究

摘要

目的：研究miRNA-214在胃癌细胞系BGC823、MKN45和SGC7901中的表达及其对细胞周期和凋亡的影响，初步探讨其机制。
　　 方法：(1)荧光定量PCR法检测人正常胃粘膜细胞系GES-1、人胃癌细胞系BGC823、MKN45和SGC7901中miRNA-214的表达；(2)瞬时转染反义核苷酸(miRNA-214inhibitor)下调miRNA-214的表达；(3)流式细胞术分析下调miRNA-214后的细胞生长周期和凋亡率的变化；(4)免疫细胞化学检测miRNA-214的靶基因PTEN蛋白在胃癌细胞中的表达。
　　 结果：(1)miRNA-214在人胃癌细胞系BGC823、MKN45和SGC7901中的表达相对于人正常胃粘膜细胞系GES-1上调，△Ct值分别为5.28±0.12，6.08±0.14，5.89±0.14，7.56±0.18，前三者分别与后者相比差异有统计学意义(P＜0.05)；(2)转染miRNA-214 inhibitor能使BGC823中miRNA-214下调，转染前后的△Ct值分别为5.32±0.59，7.11±0.33，差异有统计学意义(P＜0.05)；(3)转染后BGC823、MKN45细胞周期改变，G1期细胞增多，转染前后分别为49.33％±7.99％和60.20％±3.38％，54.85％±0.64％和69.90％±0.28％，差异有统计学意义(P＜0.05)；S期细胞减少，转染前后分别为32.67％±1.91％和21.87％±3.20％，31.20％±0.42％和18.25％±1.34％，差异有统计学意义(P＜0.05)，但对细胞凋亡率无影响，转染前后分别为2.71％±1.74％和2.88％±2.39％，2.32％±0.57％和1.89％±0.98％，差异无统计学意义(P＞0.1)；对SGC7901细胞周期和凋亡率均无影响，转染前后，G1期细胞分别为49.35％±3.18％和47.95％±2.76％，S期细胞分别为34.4％±3.68％和34.65％±3.61％，凋亡率分别为2.46％±0.25％和5.22％±2.79％，差异无统计学意义(P＞0.1)；(4)免疫细胞化学显示，转染miRNA-214 inhibitor后BGC823、MKN45中PTEN蛋白表达增强，SGC7901中PTEN蛋白表达无变化。
　　 结论：(1)人胃癌细胞系BGC823、MKN45和SGC7901中的miRNA-214呈高表达；(2)miRNA-214能使BGC823、MKN45细胞的G1期细胞减少，S期细胞增多，下调PTEN可能是其作用机制之一；(3)miRNA-214对BGC823、MKN45和SGC7901细胞的凋亡无影响。