抗日本血吸虫SIEA26-28KU-scFv-吡喹酮长循环免疫脂质体的制备

摘要

目的：
　　 制备针对日本血吸虫的第三代吡喹酮长循环免疫脂质体，为日本血吸虫病的靶向性治疗奠定工作基础。
　　 方法：
　　 1、大量表达并纯化SIEA26-28 ku-scFv
　　 大量培养带有pET32a/SIEA26-28 ku-scFv质粒的BL21(DE3)大肠杆菌，IPTG诱导SIEA26-28 ku-scFv表达，用Ni2+柱纯化目的蛋白，将纯化蛋白进行蛋白浓度测定、SDS-PAGE检测、Western Blot鉴定。
　　 2、制备吡喹酮长循环脂质体
　　 采用薄膜蒸发超声分散法制备吡喹酮长循环脂质体并测定其包封率。
　　 3、制备携带单链抗体的长循环免疫脂质体
　　 采用新型异型双功能交联剂SPDP交联抗体与脂质体，制备第三代包裹吡喹酮的长循环免疫脂质体，计算抗体偶联率。
　　 结果：
　　 1、大量表达SIEA26-28 ku-scFv，通过Ni2+螯合亲和层析法提纯单链抗体，通过Western Blot检测证明单链抗体能特异性识别日本血吸虫SIEA。
　　 2、成功制备吡喹酮长循环脂质体，计算其包封率为56.1％。
　　 3、成功制备携带单链抗体与吡喹酮的第三代长循环免疫脂质体，计算抗体偶连率为21.3％。
　　 结论：
　　 成功提取和纯化单链抗体，制备携带单链抗体和吡喹酮的第三代长循环免疫脂质体，为下一步行靶向治疗血吸虫病奠定了工作基础。