miR-155在重症肌无力中的作用及地塞米松对miR-155的影响

摘要

目的:本研究通过检测重症肌无力(MG)患者与正常人外周血B淋巴细胞中miR-155的表达和地塞米松干预后的外周血B淋巴细胞的增殖、活化、抗体分泌和miR-155表达的变化来探讨miR-155在MG发病中的作用,为以miR-155为靶点的治疗方法奠定理论依据。
　　 方法:以30例MG患者(其中全身型15例,眼肌型15例)和15例体检健康者为研究对象,提取外周血总RNA并应用qPCR技术检测miR-155的表达差异。取8例全身型MG患者和体检健康者的外周血,分离纯化B淋巴细胞并提取总RNA,qPCR技术检测miR-155的表达差异。用地塞米松和PBS干预体外培养的B淋巴细胞,检测miR-155的相对表达量,MTT法检测B细胞的增殖反应,流式细胞术检测B细胞的活化情况,ELISA检测IgG及其亚型IgG1、IgG2、IgG3的含量。
　　 结果:(1)MG患者全身型外周血PBMCs中miR-155的相对表达量高于健康者中miR-155的相对表达量(4.24±1.24,1.21±0.41),差异具有统计学意义(p＜0.05)。全身型与眼肌型及眼肌型及健康者外周血中PBMCs中miR-155的相对表达量差异无统计学意义(4.24±1.24,1.12±0.32,p＞0.05:1.12±0.32,1.21±0.41,p＞0.05)。(2)全身型MG患者组B细胞中miR-155的相对表达量高于健康组的miR-155表达量(18.04±3.88,5.42±2.25),差异有明显统计学意义(p＜0.01)。(3)地塞米松干预组,B细胞miR-155相对表达量低于PBS对照组(6.87±2.28,13.96±2.98),差异有统计学意义(p＜0.05);(4)地塞米松干预组,B细胞的增殖反应与PBS对照组无明显差异(p＞0.05);(5)DXM干预组CD86、80阳性的B细胞百分率低于PBS对照组(25.60±2.06,26.59±2.14;71.46±2.62,73.69±2.56),但差异均无统计学意义(p＞0.05);(6)DXM干预组B细胞的体外培养上清液中IgG及其亚型IgG2、IgG3较PBS组轻度降低(0.306±0.060,0.343±0.053;0.036±0.008,0.040±079;0.011±0.004,0.014±0.005),差异均无统计学意义(p＞0.05):但其亚型IgG1的含量明显低于PBS对照组(O.051±0.007,0.064±0.010),差异有统计学意义(p＜0.05)。
　　 结论:
　　 (1)miR-155高表达可能参与MG的发病;
　　 (2)糖皮质激素抑制miR-155的表达,可能通过调节B细胞的抗体类别转换发挥其治疗作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 研究对象

2.2 主要试剂与仪器

2.3 主要试剂的配制

2.4 实验方法

2.5 统计学分析

第三章 结果

3.1 眼肌型MG组、全身型MG组和正常对照组PBMCs中miR-155相对表达量的比较

3.2 免疫磁珠分选、纯化的B细胞鉴定及其纯度

3.3 全身型MG组与正常对照组B细胞中miR-155相对表达量的比较

3.4 DXM干预组与PBS对照组B细胞中miR-155相对表达量的比较

3.5 DXM干预组与PBS对照组B细胞增殖反应比较

3.6 DXM干预组和PBS对照组B细胞活化情况比较

3.6 DXM干预组与PBS对照组抗AchR-IgG及其亚型IgG1、IgG2、IgG3分泌水平的比较

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述:miRNA-155与自身免疫性疾病

致谢