人脐血单个核细胞、脐带间充质干细胞移植治疗新生大鼠脑瘫模型的研究

摘要

目的：
　　 研究人脐血单个核细胞(hUCB)、人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)、人脐血单个核细胞联合脐带间充质干细胞(hUCB联合hUCMSCs)在新生大鼠脑瘫模型中的治疗作用，初步探讨其治疗的机理；比较不同的移植途径和移植细胞种类对大鼠脑瘫模型治疗效果的差异，以期为临床细胞治疗小儿脑瘫提供一定的理论和实验依据。
　　 方法：
　　 1)应用类似Rice法即一侧颈总动脉结扎结合缺氧的方法制作新生大鼠脑瘫模型，建模3周后，观察其体重、行为学及脑组织病理变化。
　　 2)建立脑瘫模型7天后，分别将1×106个hUCB以不同的移植方式（经颈静脉、经腹腔）移植到大鼠体内，细胞移植2周后，进行体重分析、行为学分析(印记分析、步长分析、EBST)、组织病理学分析、免疫荧光染色分析。
　　 3)建立脑瘫模型7天后，分别将1×106个不同种类的细胞(hUCB、hUCMSCs、hUCB联合hUCMSCs)移植到大鼠体内，细胞移植2周后，进行体重分析、行为学分析(印记分析、步长分析、EBST)、组织病理学分析、免疫荧光染色分析。
　　 结果：
　　 1)脑缺血损伤导致大鼠体重下降；趾距和步长减少；不对称摆动；损伤同侧的大脑半球明显液化，形成空洞，脑实质明显减少；脑冠状切片显示损伤同侧的脑半球面积减少。
　　 2)经颈静脉或腹腔两种移植途径移植hUCB到大鼠脑瘫模型体内，均能增加大鼠的体重；增加趾距和步长；缓解不对称摆动；减轻脑组织损伤。损伤部位能检测到移植细胞，而且能检测到表达星形胶质神经细胞标记GFAP的移植细胞。并且从大脑解剖学观察及脑冠状切片两脑半球的面积分析上看，经颈静脉移植对脑瘫的治疗效果优于经腹腔移植。
　　 3)经颈静脉单独移植hUCB或单独移植hUCMSCs或联合移植hUCB和hUCMSCs，三种类型的细胞移植方案，均能增加大鼠的体重；增加趾距和步长；缓解不对称摆动；减轻脑组织损伤。损伤部位能检测到移植细胞，而且能检测到表达星形胶质神经细胞标记GFAP的移植细胞。并且从EBST、大脑解剖学观察及脑冠状切片两脑半球的面积分析上看，联合移植hUCB和hUCMSCs对脑瘫的治疗效果要优于单独移植hUCB或单独移植hUCMSCs。
　　 结论：
　　 应用一侧颈总动脉结扎结合缺氧的方法制作新生大鼠脑瘫模型稳定、可靠；人脐血单个核细胞(hUCB)、人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)具有治疗新生大鼠脑瘫模型的作用；经颈静脉移植对脑瘫的治疗效果优于经腹腔移植；联合移植hUCB和hUCMSCs对脑瘫的治疗效果要优于单独移植hUCB或单独移植hUCMSCs。

目录

文摘

英文文摘

图目录

专业名词缩写中英文对照表

技术路线

前言

第一章 新生大鼠脑瘫模型的制作

1.1 材料与方法

1.1.1 材料

1.1.2 方法

1.2 结果

1.2.1 新生大鼠脑瘫模型的制作

1.2.2 体重分析：脑瘫损伤造成了大鼠体重的下降

1.2.3 行为学分析

1.2.4 病理组织学分析

1.3 讨论

1.4 结论

1.5 附图

第二章 人脐血单个核细胞移植治疗新生大鼠脑瘫模型的研究

2.1 材料与方法

2.1.1 材料

2.1.2 方法

2.2 结果

2.2.1 新生大鼠脑瘫模型的制作

2.2.2 脐血单个核细胞的制备

2.2.3 脐血单个核细胞的移植

2.2.4 脐血单个核细胞移植效果的检测

2.3 讨论

2.4 结论

2.5 附图

第三章 人脐血单个核细胞联合脐带间充质干细胞移植治疗新生大鼠脑瘫模型的研究

3.1 材料与方法

3.1.1 材料

3.1.2 方法

3.2 结果

3.2.1 新生大鼠脑瘫模型的制作

3.2.2 细胞的移植

3.2.3 细胞移植效果的检测

3.3 讨论

3.4 结论

3.5 附图

总结

参考文献

综述 细胞移植治疗脑瘫的研究现状

参考文献

致谢

个人简历