阿托伐他汀联合人脐血单个核细胞静脉移植对急性心梗心肌组织血管再生影响实验研究

摘要

目的:探讨阿托伐他汀联合人脐血单个核细胞静脉移植对急性心肌梗死模型兔心肌组织血管再生的影响。
　　 方法:实验于2011-5/2011-12在中南大学湘雅医院中心实验室及中南大学动物实验部完成。①人脐血单个核细胞分离、培养及GFP转染标记。②建立急性心肌梗死模型。将建模成功60只中国成年家兔随机分成4组。对照组:建模术后24小时，沿耳缘静脉注射2ml生理盐水，并生理盐水2ml/d灌胃;阿托伐他汀组:建模术后24小时，沿耳缘静脉注射2ml生理盐水，阿托伐他汀5mg(Kg·d)溶入生理盐水2ml，灌胃;单个核细胞移植组:建模术后24小时，沿耳缘静脉注射2ml人脐血单个核细胞密度为3×107/500uL生理盐水，并生理盐水2ml/d灌胃;联合治疗组:建模术后24小时，沿耳缘静脉注射2ml人脐血单个核细胞密度为3×007/401uL生理盐水，阿托伐他汀5mg/(Kg/d)溶入生理盐水2ml灌胃。④细胞移植术后1、2、4周行超声心动图检测左室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF);荧光显微镜下心肌组织GFP转染阳性细胞检测;免疫组化检测心肌组织毛细血管密度、血管内皮生长因子(VEGF)。
　　 结果:①与对照组、阿托伐他汀组比较，单个核细胞移植组与联合治疗组移植术后1、2、4周左室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)均明显升高，联合治疗组改善更加明显。②移植术后1、2、4周，单个核细胞移植组及联合治疗组梗死区周边均可见GFP转染阳性移植细胞，联合治疗组GFP阳性细胞数量计数多于单个核细胞移植组。③移植术后1、2、4周，联合治疗组心肌梗死区周边VEGF表达，毛细血管密度高于其它三组。
　　 结论:阿托伐他汀联合人脐血单个核细胞移植能协同提高治疗急性心肌梗死疗效，优于单纯细胞移植或阿托伐他汀治疗。其机制可能是两者联合治疗血管再生作用增强，人脐血单个核细胞的心肌组织内存活率提高。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一章 材料与方法

1．材料

1．1 脐血来源

1．2 实验动物来源

2．方法

2．1 人脐血单个核细胞的分离、培养及传代

2．2 细胞移植前准备

2．3 急性心肌梗死模型建立、分组及剔除

2．4 心功能检测

2．5 动物处死及标本制作及保存

2．6 GFP转染阳性细胞检测

2．7 免疫组化检测

2．8 统计学处理

第二章 结果

3．1 人脐血单个核细胞形态学观察及活性检测

3．2 移植细胞鉴定

3．3 GFP转染细胞观察

3．4 心肌梗死模型评价

3．5 超声心功能变化

3．6 GFP转染阳性细胞检测及计数

3．7 免疫组化检测

第三章．讨论

3．1 急性心肌梗死后内环境变化及血管新生情况

3．2 他汀类药物治疗急性心肌梗死的主要可能机制

3．3 脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死的主要可能机制

3．4 阿伐他汀联合脐血单个核细胞静脉移植治疗心肌梗死的可能机制

第四章 存在问题

第五章 结论

第六章．展望

参考文献

综述

致谢