TLR9及BAFF在IgA肾病患者中的表达水平及其意义

摘要

背景:IgA肾病是原发性肾小球疾病中最常见的类型，是需要接受肾脏替代治疗的原发性肾小球疾病的首位病因。目前发病机制尚不明确，主要病理特征是肾小球系膜区和（或）毛细血管袢出现多聚IgA1。BAFF(B cell activating factor)是肿瘤坏死因子配基家族中的重要成员，主要作用是诱导B细胞增殖、分化和促进免疫球蛋白的分泌等。近年来BAFF在IgA肾病中的作用也得到一些学者的关注，结合相关研究，推测CPG-ODN可通过与B细胞表达的TLR9结合，促进IL-12、IL-18、IFN-α分泌增多，进而促进NK细胞分泌IFN-γ，而IFN-γ可上调B细胞BAFF的分泌，而BAFF的过度分泌可引起IgA1的分泌异常。目前对于IgA肾病患者外周血单个核细胞TLR9的表达、血清中BAFF的研究鲜有文献报道，尤其与血清中IgA1的相关性研究目前未有报道。
　　 目的:(1)检测IgA肾病患者外周血血清中BAFF及IgA1水平，探讨BAFF与血清中IgA1、肾脏IgA沉积强度、血尿强度的相关性。(2)检测IgA肾病患者外周血单个核细胞TLR9mRNA及蛋白表达水平，探讨并研究TLR9mRNA及蛋白水平与BAFF、IgA1相关性。以探讨IgA肾病外周血单个核细胞IgA1产生异常的分子机制，为进一步揭示IgA肾病发生发展机制提供线索，探讨其临床应用价值。
　　 方法:(1)收集30例IgAN病人及15例肾小球轻微病变病人、15例正常人外周血。(2)分离三组病人外周血单个核细胞、血清，并提取细胞总RNA及蛋白。(3)用ELISA方法检测BAFF、IgA1的表达。(4)实时定量荧光PCR检测外周血单个核细胞TLR9mRNA的表达。(5) Westernblot检测外周血单个核细胞TLR9蛋白表达水平。
　　 结果:(1)IgA肾病组较肾小球轻微病变组、正常对照组外周血血清BAFF增加，差异有统计学意义(p＜0.05，p＜0.01)。(2)IgA肾病组较肾小球轻微病变组、正常对照组IgA1增加，差异有统计学意义(p＜0.01，p＜0.01)。(3) IgA肾病组较肾小球轻微病组、正常对照组外周血单个核细胞TLR9 mRNA的表达上调，但差异无统计学意义（p值均＞0.05）。(4) IgA肾病组较肾小球轻微病变组、正常对照组外周血单个核细胞TLR9蛋白水平的表达上调，差异有统计学意义(p＜0.05，p＜0.01，)。(5) IgA肾病组TLR9蛋白表达与血清BAFF表达呈正相关（rp=0.444），有统计学意义(p＜0.05);IgA肾病组TLR9蛋白表达与血清IgA1呈正相关（rp=0.633），有统计学意义(p＜0.01)。(6) IgA肾病组血清BAFF与血清IgA1正相关（rp=0.515），有统计学意义(p＜0.01);IgAN患者血浆BAFF与肾脏病理IgA沉积强度正相关（rp=0.746）），有统计学意义(p＜0.01);但与尿手工红细胞计数的无明显相关性（rp=0.133，p＞0.05）;IgAN患者血浆IgA1与与尿手工红细胞计数的无明显相关性(rp=0.079，p＞0.05)。
　　 结论:(1)IgA肾病外周血单个核细胞细胞因子TLR9基因表达无明细上调，但蛋白分泌增加。(2) IgA肾病外周血血清BAFF、IgA1分泌增加。(3) IgA肾病组TLR9蛋白表达与血清BAFF、IgA1表达正相关(4) IgA肾病组血清BAFF与血清IgA1、肾脏IgA沉积强度正相关，但与血尿强度无明显相关性。

目录

声明

摘要

第一章 前言

第二章 材料与方法

2．1 研究对象

2．2 方法

2．3 统计学处理

第三章 结果

3．1 IgA肾病组、肾小球轻微病变组与正常对照组血清BAFF、IgA1水平

3．2 IgA肾病组血清BAFF与IgA1表达水平之间的直线相关性

3．3 IgAN肾病组血清BAFF、IgA1表达水平与肾脏病理IgA沉积强度、尿手工红细胞计数的相关性

3．4 IgA肾病组、肾小球轻微病变组与正常对照组外周血单个核细胞TLR9mRNA的表达情况

3．5 IgA肾病组、肾小球轻微病变组与正常对照组外周血单个核细胞TLR9蛋白的表达情况

3．6 IgA肾病组、肾小球轻微病变组与正常对照组外周血单个核细胞TLR9蛋白表达水平与血浆BAFF、IgA1水平的相关性

第四章 讨论

4．1 IgA肾病病人外周血血清中BAFF及IgA1的表达

4．2 IgA肾病病人外周血单个核细胞TLR9基因及蛋白的表达

4．3 BAFF、TLR9与IgA肾病

第五章 结论

参考文献

综述

致谢

攻读学位期间主要的研究成果