脑得生口服微乳与片剂药动学的比较研究

摘要

一、目的
　　 考察大鼠体内分别给予同等剂量的脑得生口服微乳和片剂后2种制剂药动学特征的差异，为脑得生口服微乳剂型设计及合理性评价提供依据。
　　 二、方法
　　 1.实验动物及给药方法
　　 1.1实验动物分组及给药剂量
　　 选择清洁级健康成年雄性SD大鼠144只(180-220g)，按体重随机分为2组，每组72只:脑得生口服微乳组(A)和脑得生片剂组(B)。
　　 给药方式:口服微乳和片剂均采用灌胃给药。
　　 给药剂量:口服微乳给药剂量为1.8mL/(kg·d)，片剂给药剂量为1.08g/(kg·d)。
　　 1.2给药方法及样品采集
　　 大鼠适应性喂养一周，实验前禁食12h。灌胃给药后分别于5，10，20，30，45min，1，1.5，2，4，6，8，12h摘除眼球采血5mL，每组每个时间点6只，于5mL的肝素抗凝EP管内，3000rpm离心10min，制备血浆，于-70℃冰箱保存。
　　 2.生物样品测定方法及数据处理
　　 2.1采用HPLC法分别测定血浆中脑得生主要活性成分HSYA、Rg1、Puer、TMP的浓度。
　　 2.2采用Excel统计软件计算AUC0～12、AUC0～∞、Cmax、Tmax、t1/2、Ke、∫tCdt、AUMC和MRT药动学参数;利用SPSS13.0统计软件对脑得生口服微乳和片剂两组血浆AUC012、AUC0～∞、Cmax Ke和MRT进行方差分析和两样本t检验，Tmax和t1/2采用两个独立样本比较的wilcoxon秩和检验。
　　 三、结果
　　 1.HPLC法测定血浆中HSYA、Rg1、Puer和TMP的方法学
　　 血浆中HSYA、Rg1、Puer和TMP分别在0.27～135、0.24～90、0.54～54和0.08～40μg·mL-1浓度范围内分离效果及线性关系良好;最低定量限分别为0.27、0.24、0.54和0.08μg·mL-1，血浆中HSYA、Rg1、Puer和TMP的保留时间分别为8.68、8.26、6.03和6.44min;高、中、低浓度平均萃取回收率(RSD)分别为(n=5)95.69％(2.7％)、95.03％(2.5％)、90.20％(1.5％)和93.54％(0.98％);方法回收率(RSD)分别(n=5)在92.73％～99.34％(1.2％～6.9％)、98.30％～98.92％(1.2％～1.7％)、97.91％～99.01％(0.86％～1.4％)和99.21％～100.57％(1.1％～1.7％);日内精密度分别均小于10.2％、4.42％、1.17％和3.30％，日间精密度分别均小于7.85％、4.60％、0.873％和1.48％;高、中、低三种浓度的质控样品稳定性良好，浓度变异分别均小于6.53％、4.75％、1.11％和0.32％。
　　 2.脑得生微乳和片剂在大鼠血浆中的药动学
　　 脑得生口服微乳中HSYA、Rg1、Puer、TMP在大鼠血浆中AUC0-12分别为24.16±0.54、23.64±0.81、28.08±0.33和3.15±0.07μg·h·mL-1;AUC0-∞分别为25.79±0.99、25.23±0.66、34.01±0.72和3.26±0.07μg·h·mL-1; t1/2分别为2.96±0.30、3.38±0.30、3.84±0.16和3.14±0.29h;Cmax分别为10.89±0.16、15.34±0.07、22.75±0.43和6.08±0.01μg·mL-1; MRT分别为5.27±0.29、4.22±0.07、5.51±0.15和6.49±0.22h。
　　 脑得生片剂中HSYA、Rg1、Puer、TMP在大鼠血浆中AUC0-12分别为19.48±0.82、17.96±0.09、20.59±0.33和1.82±0.08μg·h·mL-1;AUC0-∞分别为20.60±1.49、19.36±0.09、26.34±1.08和6.05±2.91μg·h·mL1; t1/2分别为2.68±0.54、3.51±0.07、2.45±0.11和3.14±0.23h;Cmax分别为7.39±0.12、10.47±0.04、12.83±0.05和2.95±0.46μg·mL-1; MRT分别为4.93±0.56、4.64±0.06、6.96±0.19和6.96±0.11h。
　　 四、结论
　　 1.方法学
　　 本实验方法可准确、快速测定大鼠血浆中HSYA、Rg1、Puer、TMP的浓度。
　　 2.动物实验
　　 与片剂相比，脑得生口服微乳中HSYA、Rg1、Puer、TMP的AUC0-12、AUC0-∞和Cmax均有显著地提高(p＜0.05)，提示脑得生口服微乳能够促进其主要成分HSYA、Rg1、Puer、TMP的吸收程度。

目录

声明

摘要

英文缩写词表

前言

第一部分 HPLC法测定血浆中HSYA、Rg1、Puer、TMP浓度方法学的建立

1 实验材料

1．1 仪器

1．2 药品与试剂

2 方法

2．1 溶液的配制

2．2 色谱条件

2．3 样品处理

2．4 质控样品

2．5 方法学验证

3 结果

4 讨论

4．1 试验方法的选择

4．2 色谱条件的选择

5 结论

第二部分 脑得生口服微乳与片剂药动学的比较研究

1 材料与仪器

1．1 仪器

1．2 药品与试剂

2 动物实验

2．1 实验动物与饲养环境

2．2 实验动物分组

2．3 给药方式及给药剂量

2．4 样品采集

2．5 样品处理及测定

2．6 数据处理

3 结果

4 讨论

5 结论

全文总结及展望

参考文献

综述

致谢

攻读学位期间研究成果