星形胶质细胞介导的ENT1及ADK在颞叶癫痫大鼠海马中的动态表达及相关性研究

摘要

目的:观察星形胶质细胞介导的平衡核苷转运体1(equilibrativenucleoside transporters1，ENT1)及腺苷激酶(adenosine kinase，ADK)在颞叶癫痫大鼠模型不同时期海马中的动态表达及其相关性，探讨其在癫痫发病过程中作用。
　　 方法:按照随机的原理将6-8周龄健康雄性SD大鼠84只，随机分为实验组(n=60)、对照组(NS组）(n=12)及正常组(n=12)。实验组予以腹腔注射氯化锂-匹罗卡品建立颞叶癫痫模型;NS组予以腹腔注射等剂量无菌生理盐水;正常组未予特殊处理。实验组又根据癫痫急性期、潜伏期、慢性期按观察时间点分为5个亚组，即癫痫持续状态(statusepilepticus，SE)后2小时(2h)、1天(1d)、7天(7d)、15天(15d)及30天(30d)，每亚组各12只。以上各小组再随机分为2个小组，每小组6只大鼠，分别进行:1.Western blot方法检测ENT1及ADK在海马中的表达;2.免疫组织化学检测各组大鼠海马不同区域（CA1区、CA3区、DG区）ENT1及ADK的表达及免疫荧光双标法检测星形胶质细胞介导的海马ENT1及ADK的表达变化。
　　 结果:
　　 1.实验组大鼠SE诱发成功率86.7％，死亡率为18.3％，模型成功率为68.3％。
　　 2.实验组大鼠海马ENT1蛋白表达:ENT1蛋白的表达在SE后2小时显著下调(p＜0.01)，1天后有所恢复，但仍低于正常水平(p＜0.01)，后继续上调，至SE后7天恢复至正常水平(p＞0.05)，15天明显上调(p＜0.01)，30天达到高峰(p＜0.01)。
　　 3.实验组大鼠海马ADK蛋白表达:ADK蛋白的表达在SE后2小时表达下调(p＜0.01)，1天后恢复至正常水平(p＞0.05)后进行性上升，30天达到高峰(p＜0.01)。
　　 4.各组大鼠海马不同区域均可检测到ENT1及ADK的表达，且其表达量随SE后不同时期发生改变:在SE后2h下调(p＜0.01)，后随着时间推移，ENT1及ADK表达上调。
　　 5.各组大鼠海马CA1区均可检测到星形胶质细胞与ENT1及ADK共表达，且在SE后2h下调(p＜0.01)，后随着时间推移，星形胶质细胞增生，ENT1及ADK表达上调。
　　 结论:
　　 1.在颞叶癫痫大鼠海马组织中:急性期，ENT1及ADK表达下调;慢性期，ENT1及ADK表达上调，两者呈正相关。
　　 2.星形胶质细胞通过ENT1及ADK的表达变化调节突触间隙腺苷水平可能是癫痫的发病机制之一。

目录

声明

论文说明

摘要

缩略词

第一章 前言

第二章 材料和方法

2．1 实验材料和仪器

2．2 实验方法

2．3 结果观察和判断标准

第三章 结果

3．1 氯化锂-匹罗卡品致痫模型及其行为学变化

3．2 SE后不同时期海马组织ENT1及ADK的蛋白表达变化

3．3 SE后不同时期海马各区ENT1及ADK的表达

3．4 SE后不同时期海马CA1区星形胶质细胞介导的ENT1及ADK表达变化

第四章 讨论

4．1 氯化锂-匹罗卡品致痫动物模型

4．2 氯化锂-匹罗卡品癫痫模型诱发SE后海马ENT1的表达变化

4．3 氯化锂-匹罗卡品癫痫模型诱发SE后海马ADK的表达变化

4．4 ENT1及ADK在颞叶癫痫大鼠模型中的作用机制

4．5 本实验的局限性及下一步设想

第五章 结论

参考文献

Review

综述

致谢

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