同种异体肋软骨细胞修复兔膝关节全层软骨缺损的研究

摘要

目的:探讨同种异体肋软骨细胞复合透明质酸钠对兔膝关节全层软骨缺损的修复作用。
　　方法:手术获取新西兰大白兔肋软骨，分离、培养肋软骨细胞，从细胞形态学、番红O-固绿染色、阿尔辛蓝染色、型胶原免疫细胞化学染色，生长特性方面对肋软骨细胞进行鉴定，从而优选出适合软骨组织工程研究的合适代数。将36只雄性新西兰大白兔制备膝关节全层软骨缺损模型并随机分为空白组，对照组及实验组3组(n=12)。空白组不做特殊处理;对照组关节腔内单纯注入透明质酸钠;实验组关节腔内注入肋软骨细胞/透明质酸钠复合物。各组在术后第1、2、3月分别随机处死4只动物获取股骨远端标本，进行肉眼大体观察、病理组织学检测，并按O' Driseoll，keeley and salter法进行组织学评分。
　　结果:在形态上原代肋软骨细胞与第1代肋软骨细胞无明显差别，第2、3、4代肋软骨细胞形态逐渐变长，梭形细胞数量随细胞代数递增，第5代开始梭形细胞数量明显增多，向成纤维细胞转化。第2代肋软骨细胞阿尔辛蓝染色，番红O-固绿染色及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色均呈强阳性。
　　空白组和对照组全层软骨缺损处主要为纤维组织修复，实验组全层软骨缺损处为软骨组织修复，阿尔辛蓝染色，番红O-固绿染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色均呈阳性。O' Driseoll，keeley and salter评分:术后1月:实验组＞对照组＞空白组，空白组与对照组比较无统计学意义（P＞0.05），实验组与空白组，实验组与对照组比较均有统计学意义（P＜0.05）;术后2月:实验组＞对照组＞空白组，三组间两两比较均有统计学意义（P＜0.05）;术后3月:实验组＞对照组＞空白组，三组间两两比较均有统计学意义(P＜0.05)。空白组评分:术后1月＞术后2月=术后3月，三组间两两比较均无统计学意义（P＞0.05）;对照组评分:术后1月＜术后2月＜术后3月，三组间两两比较均有统计学意义(P＜0.05);实验组评分:术后1月＜术后2月＜术后3月，三组间两两比较均有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:第2代肋软骨细胞适合作为软骨组织工程的种子细胞;肋软骨细胞复合透明质酸钠修复兔膝关节全层软骨缺损近期效果满意。