胰岛抗原特异性T细胞检测对临床初诊2型糖尿病免疫分型的价值

摘要

目的:成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)是一种T细胞介导的自身免疫性疾病。目前LADA的诊断依赖胰岛自身抗体(Ab)检测。本研究采用酶联免疫斑点(ELISPOT)技术检测临床初诊2型糖尿病(T2D)患者的胰岛抗原反应性T细胞，探讨从临床T2D患者中筛查一类新型LADA——T-LADA（Ab阴性、胰岛抗原T细胞反应阳性的临床T2D患者）的可能性。
　　方法:对临床初诊T2D患者采用放射配体法检测血清中谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）及锌转运体8自身抗体(ZnT8A)，从而选取Ab+的临床T2D患者34例，Ab-T2D患者31例。联合谷氨酸脱羧酶（GAD65）、C肽(CP)两种全长胰岛自身抗原采用ELISPOT方法检测受试者干扰素(IFN)-γ分泌性CD4+T细胞。根据T细胞结果将临床初诊T2D患者分为T细胞阳性(T+)和T细胞阴性(T-)两组，比较其临床特征。进一步根据Ab和T细胞检测结果将研究患者分为Ab+T+、Ab+T-、Ab-T+和Ab-T-四个亚组，比较各组临床特征。按年龄、性别和Ab情况进行匹配，选取T+组9人、T-组8人，随访至平均第15个月(12-23月)，比较T+组和T-组随访时胰岛β细胞功能的变化。
　　结果:(1)在31例Ab-临床T2D患者中，8例存在IFN-γ分泌性CD4+T细胞反应（单独GAD-T+3例，单独CP-T+4例，二者均阳性1例）;34例Ab+临床T2D患者中16例呈T细胞反应阳性（单独GAD-T+2例，单独CP-T+9例，二者均阳性5例）。(2)T+组和T-组的空腹C肽(FCP)、餐后2hC肽(2hCP)和△CP(2hCP-FCP)均无统计学差异。Ab+组FCP低于Ab-组(P=0.033)，经病程、BMI校正后，差异仍具有统计学意义。(3)Ab+T+、Ab+T-、Ab-T+和Ab-T-四个亚组的FCP、2hCP和△CP均无统计学差异。(4)与基线比较，T+组和T-组在平均第15个月随访时FCP、2hCP以及△CP均未发现有统计学意义的变化。
　　结论:(1)在Ab-的临床T2D患者中识别出一组胰岛抗原特异性T细胞反应阳性的新的LADA类型——T-LADA。(2)暂未发现T-LADA患者与经典T2D患者(Ab-T-)的临床表型的差异。尚需进一步扩大样本量、延长随访时间进行研究。