经导管射频消融去肾交感神经术对高血压犬左室肥厚及VEGFR1-PKG I-Calcineurin通路的影响

摘要

目的:
　　明确经导管射频消融去肾交感神经术(RDN)对高血压犬左室肥厚的影响。其次，观察经导管射频消融肾交感神经对高血压犬心肌血管内皮生长因子(VEGF)-血管内皮生长因子受体-1（VEGFR-1）-cGMP依赖性蛋白激酶-1（PKG-1）-钙调神经磷酸(Calcineurin)的变化，探讨经导管射频消融肾交感神经对改善左室肥厚的可能机制。
　　方法:
　　将比格犬(n=28)分为高脂组(n=22)和对照组(n=6)，高脂组予以高脂饮食饲养建立高血压犬模型，对照组给予普食。12周后，将建模成功的高血压犬(n=20)随机分组为手术组和假手术组每组10只，实验过程中手术组1只、假手术组2只死亡;最后纳入统计分析的比格犬数量为手术组(n=9)和假手术组(n=8)。手术组给予射频消融肾交感神经术，假手术仅予以肾动脉造影。于基线、术前、术后（1、2、4、6月）用无创血压计测定血压;同时于基线、术前、术后6月行心脏彩超计算心脏各个腔径、左室重量指数及E峰/A峰比值。术后6月处死比格犬，采血、取心脏组织。采用HE染色和电镜观察心肌细胞形态;CD31免疫组织化学方法染心肌组织中毛细血管计算毛细血管密度。Western Blot检测PKG-1、Calcineurin蛋白表达;Real Time PCR检测左心室心肌中VEGF、VEGFR-1、PKG-1表达。
　　结果:
　　1.与对照组相比，假手术组及手术组体重、血压、左室重量指数均显著增加(P＜0.05);E峰/A峰比值明显减低(P＜0.05)。手术组RDN术后6月，血压、左室重量指数显著低于假手术组（P＜0.05)而E峰/A峰比值明显增高(P＜0.05)。假手术组血压、左室重量指数显著高于对照组（P＜0.05)。
　　2.与对照组相比，假手术组犬左室重量明显增加，差异有统计学意义(P＜0.05);手术组左室重量低于假手术组(P＜0.05)。
　　3.假手术组HE染色显示心肌细胞大小、横截面面积明显大于手术组，排列不整齐;电镜下观察发现心肌细胞中可见多个灶型肌丝溶解断裂、线粒体细胞明显水肿、线粒体细胞数明显减少;CD31免疫组化染色显示，与手术组相比，
　　心肌中毛细血管密度显著减少，差异有统计学意义(P＜0.05)。手术组心肌细胞大小、横截面面积明显小于假手术组，排列比较整齐;心肌中部分肌丝溶解断裂、部分线粒体细胞水肿;心肌中毛细血管密度显著高于假手术组，但仍然低于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。
　　4.VEGF-VEGFR-1-PKG-1-Calcineurin表达水平的差异:手术组、对照组心肌VEGF mRNA表达均高于假手术组，但差异无统计学意义(P＞0.05)。手术组心肌VEGFR-1 mRNA表达、PKG-1mRNA及蛋白表达均明显高于假手术组，差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比，手术组VEGFR-1mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05)而PKG-1 mRNA及蛋白表达明显增高(P＜0.05);假手术组VEGFR-1 mRNA表达、PKG-1 mRNA及蛋白表达均明显低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。手术组心肌Calcineurin蛋白表达显著低于假手术组，差异有统计学意义(P＜0.05);手术组与对照组相比无统计学意义(P＞0.05);假手术组心肌Calcineurin蛋白表达显著高于对照组(P＜0.05)。
　　5.VEGFR-1-PKG-1-Calcineurin与左室重量指数相关性分析:左室重量指数与VEGFR-1及PKG-1表达水平均呈负相关，而与Calcineurin表达水平呈正相关。
　　结论:
　　在高血压犬模型中，经导管射频消融去肾交感神经术不仅能有效降低血压，而且可改善左室肥厚和左室舒张功能，其机制可能是通过VEGFR-1介导引起心肌毛细血管生成增加，上调PKG-1表达进而抑制Calcineurin/NFAT通路实现。

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摘要

Abstract

CONTENT

ABBREVIATION

1 INTRODUCTION

2 MATERIALS AND METHODS

2．1 MATERIALS

2．2 METHODS

2．3 Statistical Analysis

3 RESULTS

3．1 Hypertension Model

3．2 Left Ventricular Hypertrophy

3．3 Diastolic Dysfunction

3．4 The Effects of Renal Denervation

3．5 Safety and Complication of the Procedure

4 DISCUSSION

4．1 Hypertension and Left Ventricular Hypertrophy

4．2 The Effect of RDN on Blood Pressure

4．3 The Effect of RDN on The Regression of Left Ventricular Hypertrophy

4．4 Limitation

4．5 Summary

5 CONCLUSION

REFERENCES

REVIEW Role of Renal Sympathetic Denervation in Regression of Left Ventricular Hypertrophy

PUBLISHED PAPER

ACKNOWLEDGEMENT