应用Epcam特异性核酸适体探针对结肠癌冷冻切片成像初探

摘要

目的:
　　本实验收集了44例结肠癌系列标本，通过应用Epcam特异性核酸适体探针对结肠癌组织的冰冻切片进行荧光成像，为结肠癌的诊断提供了一种新的有效的分子工具。
　　方法:
　　①收集44例结肠癌系列标本，每例标本来源于同一病人，包括结肠癌和正常结肠组织。每例标本制作成2张冰冻切片，分别用于Epcam核酸适体荧光成像和HE染色;制作成4张石蜡切片，分别用于Epcam核酸适体、Epcam抗体（anti-EpEX和anti-EplCD）荧光成像及HE染色。
　　②荧光显微镜下观察Epcam核酸适体和Epcam抗体分别在结肠癌和正常结肠的石蜡切片及冰冻切片上的成像及荧光信号的强度。
　　结果:
　　①核酸适体SYL3C在结肠癌冰冻切片及石蜡切片的荧光信号呈强阳性，而正常结肠信号很弱。
　　②Epcam抗体在结肠癌石蜡切片荧光信号呈强阳性，正常结肠信号很弱。
　　③Epcam核酸适体在44例结肠癌系列标本的冰冻切片的荧光成像显示，41例结肠癌荧光信号强，属过度表达组，3例结肠癌荧光信号弱，属非过度表达组。而44例正常结肠荧光信号弱，属非过度表达组。Epcam在结肠癌及正常结肠的表达差异有统计学意义。
　　结论:
　　①核酸适体SYL3C特异性识别病理组织Epcam，在冰冻切片上的成像清晰度优于在石蜡切片，方法简便快捷，并可一次性对胞内外Epcam成像。
　　②Epcam特异性核酸适体SYL3C可作为探针用于鉴别结肠癌和正常结肠，提供了一种新的可用于结肠癌诊断的分子工具。
　　③对鉴别上皮来源和非上皮来源的恶性肿瘤有一定意义。

目录

声明

论文说明

摘要

缩略词

1 前言

2 材料和方法

2．1 材料和试剂

2．1．1 主要仪器与耗材

2．1．2 主要试剂

2．2 研究方法

2．2．1 冰冻切片的制作和HE染色

2．2．2 石蜡切片的制作和HE染色

2．2．3 Epcam抗体在石蜡切片的孵育

2．2．4 核酸适体SYL3C在石蜡切片的孵育

2．2．5 核酸适体SYL3C在冰冻切片的孵育

2．3 免疫荧光染色评估和统计学分析

3 结果

3．1 核酸适体SYL3C在结肠癌组织的荧光成像

3．2 核酸适体SYL3C在结肠癌系列标本冰冻切片的荧光成像

3．3 SYL3C在结肠良性病变及Epcam阴性肿瘤的冰冻切片上无结合

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 上皮细胞黏附分子在正常与疾病中的研究

致谢