全反式维甲酸对大鼠脑缺血再灌注损伤后MMP-9表达的影响

摘要

目的：通过观察全反式维甲酸(all trans retinoic acid,ATRA)对缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase9，MMP-9)表达的影响，探讨ATRA的神经保护作用及可能机制。
　　方法：健康雄性成年SD大鼠180只，随机分为3组，每组60只，即假手术组（Sham组），缺血再灌注手术组（OP组）和ATRA干预组（ATRA组）。Sham组只行颈部手术，不行血管栓塞，ATRA组和OP组按ZeaLonga方法行大脑中动脉栓塞。ATRA组术后每日予以30 mg/kg ATRA油溶液灌胃，Sham组和OP组每日食用油灌胃。每组分别于造模后1天，3天和7天，行TTC染色、EB染色、免疫组化和Western Blot检测MMP-9。
　　结果：
　　1.神经功能评分
　　Sham组大鼠无运动功能缺损，Bederson评分均为0分。与OP组比较，ATRA3天组大鼠Bederson评分有显著改善(P＜0.05)，1天组和7天组改善不显著(P＞0.05)。
　　2.TTC染色
　　Sham组大鼠TTC染色未发现梗死区域。OP组1天时脑梗死最明显，3天、7天时梗死体积逐渐减小;和OP组比较，ATRA组各时间点梗死体积均减小，其中1天、7天组有统计学意义(P＜0.05)。
　　3.EB含量
　　Sham组各时间点脑组织EB含量均较低。OP组EB含量再灌注后1天达高峰，后逐渐下降，7天尚未降至Sham组水平。与Sham组相比，OP组大鼠1天、3天、7天各时间点EB含量均显著升高(P＜0.05）。与OP组相比，ATRA组各时间点EB含量均减少，其中1天组和7天组具有统计学意义(P＜0.05）。
　　4.免疫组化
　　Sham组大鼠脑组织内基本无MMP-9表达。OP组和ATRA组大鼠MMP-9主要在梗死区及梗死区附近的胶质细胞的胞浆中表达。与Sham组相比，OP组MMP-9的表达明显增多，其中3天，7天组具有统计学意义(P＜0.05)。与OP组比较，ATRA组各时间点MMP-9的表达均减少，其中3天和7天组有统计学意义（P＜0.05）。
　　5.Western Blot
　　与Sham组比较，OP组1天、3天、7天各时间点MMP-9的表达均显著增加(P＜0.05)。与OP组比较，ATRA组1天、3天和7天组MMP-9表达均显著降低(P＜0.05)。
　　结论：
　　ATRA减轻MCAO大鼠血脑屏障的损伤，可能机制为通过下调MMP-9的表达。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

1．前言

2．材料与方法

2．1 主要材料

2．2 主要试剂

2．3 主要仪器

2．4 试验方法

2．4．1 实验动物及分组

2．4．2 大鼠脑缺血再灌注模型的制备和评价

2．4．3 TTC染色剂脑梗塞体积测定

2．4．4 伊文思蓝染色

2．4．5 脑组织灌注固定与石蜡切片制作

2．4．6 免疫组化检测MMP-9

2．4．7 免疫印迹法测MMP-9表达

2．4．8 统计处理

3．结果

3．1 行为观察

3．2 TTC染色

3．3 EB染色

3．4 免疫组化

3．5 Western Blot

4．讨论

4．1 大鼠缺血再灌注模型和梗死体积的评价

4．2 基质金属蛋白酶和BBB的关系

4．3 ATRA对MMP-9表达的影响

5．结论

参考文献

综述 维甲酸在成人中枢神经系统中的作用

致谢