胃癌组织中DNA含量、异倍体、细胞增殖活性、PTEN蛋白表达的研究

摘要

目的:研究DNA含量、异倍体、细胞增殖活性变化与胃癌癌旁组织的恶性范围的相关性;研究异倍体率、细胞增殖活性、PTEN蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系以及PTEN基因在胃癌发生过程中可能作用机制。
　　方法:采用流式细胞术对40例胃癌及相应癌旁新鲜组织中细胞DNA含量、细胞增殖活性进行定量检测,根据DNA含量来决定异倍体。采用免疫组织化学S-P法检测20例正常胃粘膜和40例胃癌组织、癌旁组织的PTEN基因的蛋白表达水平的改变。并结合临床资料分析其临床意义。
　　结果:流式细胞术检测结果显示:胃癌组织中DI值为1.35±0.10,PI值为18.25±3.32,异倍体率82.5％(33/40);癌旁组织3㎝、5㎝、7㎝、手术断端处 DI值分别为1.20±0.08、1.17±0.05、1.01±0.03、0.96±0.01,PI值分别为16.03±3.27、15.92±3.20、9.54±2.23、6.27±2.17,异倍体率70.0%、65.0%、17.5%、7.5%。经统计分析胃癌组织、癌旁组织3㎝、5㎝DI值、PI值、异倍体率高于癌旁组织7㎝、手术断端处(P<0.05);胃癌组织、癌旁组织3㎝、5㎝之间的DI值、PI值、异倍体率分别比较无差异(P﹥0.05)。异倍体率、PI值与年龄、性别、肿瘤大小无关(P﹥0.05);高分化胃癌组异倍体率、PI值低于低分化胃癌组(P<0.05);无淋巴结转移胃癌组异倍体率、PI显著低于有淋巴结转移胃癌组(P<0.05);当浸润到粘膜下层,TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期胃癌组异倍体率、PI值显著低于浸润到肌层或浆膜层,TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期胃癌组(P<0.05)。
　　免疫组织化学法结果显示:PTEN蛋白定位于胃粘膜上皮细胞的胞浆,呈黄色至棕黄色着色。20例正常胃粘膜组织中PTEN蛋白全部为阳性表达,表达率为100.00%(20/20)。40例胃癌组织中只有18例呈阳性表达,表达率为45.00%(18/40)。可见胃癌组织中存在PTEN蛋白表达下调,其阳性表达率明显低于正常胃粘膜组织(P<0.05)。其中高分化胃癌PTEN蛋白阳性表达率为80.00%(4/5),低分化胃癌为36.67%(11/30)。经统计学分析,PTEN蛋白阳性表达率与性别、年龄无关,而与肿瘤大小有关。低分化胃癌组PTEN蛋白阳性表达率明显低于高分化胃癌组(P<0.05)。有淋巴结转移胃癌组PTEN蛋白阳性表达率仅为42.86%(15/35),无淋巴结转移胃癌组PTEN蛋白阳性表达率为60.00%(3/5),差异有显著性意义(P<0.05)。当浸润到粘膜下层,TNM分期为Ⅰ、Ⅱ期胃癌组PTEN蛋白表达率显著低于浸润到肌层或浆膜层,TNM分期为Ⅲ、Ⅳ期胃癌组,两组的差异有显著性意义(P<0.05)。弥漫型胃癌 PTEN蛋白表达阳性率26.1%(6/23)显著低于肠型胃癌70.6%(14/17),差异有显著性意义(P<0.05)。PTEN蛋白表达与DNA含量无关。PTEN蛋白表达阳性时异倍体率、细胞增殖活性(PI)显著低于PTEN蛋白表达阴性时异倍体率、细胞增殖活性,两者比较差异有显著性意义(P<0.05)。
　　结论:
　　1、DNA含量、异倍体率、细胞增殖活性在癌组织、癌旁组织中呈递减趋势。
　　2、异倍体率、细胞增殖活性与胃癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度有关。
　　3、胃癌组织PTEN蛋白阳性表达率明显低于正常胃粘膜,提示PTEN蛋白表达在胃癌组织中下调。
　　4、在不同分化胃癌中PTEN蛋白表达率不相同,随着分化程度的降低,阳性表达率降低,表明 PTEN蛋白表达与胃癌分化程度呈正相关。淋巴结转移胃癌组PTEN蛋白阳性表达率明显低于无淋巴结转移胃癌组,提示PTEN蛋白表达与胃癌淋巴结转移呈负相关。

目录

封面

声明

目录

附录

中文摘要

英文摘要

前言

实 验 材 料

一、主要试剂与配制：

二、主要仪器与器材

实 验 方 法

一 取材

二 临床病理资料

三 单细胞悬液制备

四 流式细胞仪分析

五 石蜡切片制作

六 苏木素－伊红染色

七 免疫组织化学染色

八 结果判断

九 统计学分析

实 验 结 果

（一）、流式细胞术结果

(二) 免疫组化结果

讨论

结论

参考文献

文 献 综 述

在读期间发表论文

致谢