MIF在大鼠肺纤维化组织中的表达及黄芪甲甙干预的研究

摘要

目的：建立博莱霉素致大鼠肺纤维化的动物模型，观察不同时间点肺组织巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)的变化，探讨MIF在肺纤维化形成中的作用；采用黄芪甲甙对大鼠肺纤维化干预，研究黄芪甲甙对实验性大鼠肺纤维化及纤维化肺组织中MIF表达的影响。 方法：清洁级健康、雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠72只，随机分为对照组、模型组、黄芪甲甙干预组、地塞米松干预组，每组18只。模型组、干预组及地塞米松组气管内注射博来霉素(BLM，5mg/kg)诱导肺纤维化，对照组注射生理盐水。第二天起黄芪甲甙干预组大鼠每天经胃管灌服黄芪甲甙(0.1g/L)2ml，地塞米松干预组大鼠每天地塞米松(3mg/kg)腹腔注射，其余两组相同条件下给予助溶剂羧甲基纤维素钠灌胃。每组按7天、14天、28天处死动物6只，取出肺组织，进行病理学观察；检测肺组织羟脯氨酸含量；用免疫组化和RT-PCR观察各组大鼠肺组织MIF蛋白及MIF mRNA表达水平。 结果： 1.肺组织HE染色、Masson染色对照组大鼠未见病变。模型组大鼠第7天表现为明显的急性炎症，肺泡腔、肺间质内有大量的多核及单核细胞浸润，伴有水肿和轻度出血，病变严重区肺泡正常结构被炎性肉芽组织破坏。第14天肺泡炎症较前有所减轻，但仍有出血及水肿，成纤维细胞增多，肺间隔明显增宽，有胶原沉积及斑片状的纤维化改变；第28天组，肺泡炎症较前略有减轻，肺泡结构破坏，大量胶原沉积在新生的毛细血管周围，肺泡间隔及部分肺泡腔被胶原和纤维蛋白占据，且间质内炎性细胞逐渐以淋巴细胞浸润为主。干预组与模型组病理变化相似，但肺泡炎、肺纤维化程度都轻于模型组(P<0.05)，两干预组间比较无统计学差异(P>0.05)。 2.羟脯氨酸(HYP)含量模型组HYP含量随造模时间的延长逐渐增高，第28天达到最高值，各时间点含量均高于对照组(P<0.05)；各干预组HYP含量成低水平增高趋势，均高于对照组而低于模型组(P<0.05)，两干预组间比较无统计学差异(P>0.05)。 3.肺组织MIF和MIF mRNA在肺纤维化过程中的表达(SABC法RT-PCR)免疫组化以及RT-PCR结果显示MIF和MIF mRNA在正常大鼠肺组织呈弱表达；模型组表达增强，以第14天最明显，各时间点与正常组比较均有统计学差(P<0.05)；两干预组MIF和MIF mRNA表达量呈低水平升高，低于模型组(P<0.05)，两干预组间比较无统计学差异(P>0.05)。 结论： 1、MIF在大鼠肺纤维化组织中高表达，有可能参与了肺纤维化的发病。 2、黄芪甲甙能减轻大鼠肺纤维化程度，其机制可能与抑制MIF的过度表达有关。