雷帕霉素对大鼠血管平滑肌细胞迁移及β3整合素，FAK，MMP表达的影响

摘要

目的：(1)研究雷帕霉素对血管平滑肌细胞的迁移抑制作用。(2)通过对β3整合素，FAK，MMP2，p38MAPK的检测初步探讨雷帕霉素抑制血管平滑肌细胞迁移的作用机制。 方法：(1)采用组织块贴壁法原代培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞。(2)采用细胞划痕试验和Transwell试验检测不同浓度雷帕霉素干预后细胞迁移能力的变化。(3)采用免疫细胞化学方法观察不同浓度雷帕霉素干预后细胞中β3整合素，FAK，MMP2蛋白表达的变化。(4)采用RT-PCR方法观察不同浓度雷帕霉素干预后细胞中FAKmRNA，MMP2mRNA表达的变化。(5)采用蛋白质免疫印迹方法观察不同浓度雷帕霉素干预后细胞后细胞中p38MAPK表达的变化。 结果：(1)雷帕霉素能明显抑制血管半滑肌细胞迁移。1)雷帕霉素处理24h后，5nmol/L、10nmol/L、20nmol/L、40nmol/L四个浓度组的迁移抑制率间差异有统计学意义(P<0.05)；处理48h后，四个浓度组的迁移抑制率间差异有显著性(P<0.01)。2)雷帕霉素处理24h及48h后，相对迁移距离5nmol/L、10nmol/L、20nmol/L组与对照组比较有统计学差异(P<0.05)，40nmol/L组与对照组比较，差异有显著性(P<0.01)。(2)5、10、20、40nmol/L雷帕霉素作用后的β3整合素，FAK，MMP2表达明显低于对照组，P<0.05。(3)10、20、40nmol/L雷帕霉素作用后的FAKmRNA，MMP2mRNA表达低于对照组，P<0.05。(4)10、20、40nmol/L雷帕霉素作用后p38MAPK表达低于对照组，P<0.05。 结论：(1)雷帕霉素能抑制血管甲滑肌细胞迁移，迁移抑制率和相对迁移距离与雷帕霉素干预浓度成正相关。(2)雷帕霉素干预后，能下调β3整合素，FAK，MMP2，p38MAPK在血管平滑肌细胞中的表达，且下调程度与雷帕霉素干预浓度成正相关。(3)雷帕霉素抑制血管平滑肌细胞迁移的机制可能与其下调β3整合素，FAK，MMP2，p38MAPK在血管平滑肌细胞中的表达有关。