淋病奈瑟菌感染小鼠模型的建立及抗淋病核酸疫苗免疫保护性研究

摘要

目的：用17-β-雌二醇和抗生素对BALB/c小鼠进行预处理，尝试建立淋病奈瑟菌感染小鼠模型，并用此动物模型初步检验粘膜佐剂LTB优化的淋病核酸疫苗pcDNA3.1(-)/ltB-porB的免疫保护作用，为研制人用高效抗淋病核酸疫苗提供理论和实验依据。 方法：本实验分为两个部分： 1.建立淋病奈瑟菌感染小鼠实验模型：选择处于动情间期的4～6周龄的BALB/c雌鼠，用17-β-雌二醇和抗生素预处理后经小鼠阴道行淋球菌攻击，每24h取小鼠分泌物在T-M选择培养基上培养，计数菌落数，涂片革兰染色镜检，并用淋球菌PCR快速诊断试剂盒鉴定；小鼠阴道分泌物涂片瑞氏染色，计数多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes，PMNs)占阴道细胞数的百分比，并与对照组进行比较。 2.检验抗淋病核酸疫苗pcDNA3.1(-)/ltB-porB的免疫保护作用：将核酸疫苗组pcDNA3.1(-)/ltB-porB、pcDNA3.1(-)/porB和对照组pcDNA3.1(-)/ltB、pcDNA-3.1(-)空质粒免疫雌性BALB/c小鼠，按照第一部分的方法建立淋球菌感染小鼠模型，用2×107cfu淋球菌攻击，计数实验组和对照组淋球菌菌落生长数和PMNs占阴道细胞数的百分比，分析比较核酸疫苗的免疫保护作用。 结果： 1.雌性BALB/c小鼠动情间期，用17-β-雌二醇和抗生素预处理后，阴道角化细胞与有核细胞表面粘附有淋球菌，并且在连续3～4d内实验组PMNs所占百分比明显高于对照组(P<0.05)。 2.pcDNA3.1(-)/ltB-porB、pcDNA3.1(-)/porB鼻饲免疫组小鼠在第2、3、4、6、7、8天，小鼠阴道淋球菌存活数明显少于对照组(P<0.05)，此时PMNs所占百分比实验组与对照组间无显著性差异(P<0.05)；pcDNA3.1(-)/ltB-porB组清除淋球菌速度明显快于pcDNA3.1(-)/porB免疫组(P<0.05)。 结论： (1)成功建立了雌激素预处理的淋病奈瑟菌感染小鼠实验模型。 (2)抗淋病核酸疫苗pcDNA3.1(-)/porB对淋球菌的感染具有一定的免疫保护作用。 (3)粘膜佐剂LTB能增强核酸疫苗pcDNA3.1(-)/porB的免疫保护作用。