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维生素对人A375黑素瘤细胞株黑素合成的影响

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目的:维生素C、维生素E和维生素B等具有抗氧化作用的维生素类药物通过调控酪氨酸酶活性而影响黑素合成,已成为色素相关性皮肤病治疗的一个方向。本文通过观察维生素C、维生素E、维生素B1、维生素B6及维生素B12对人A375黑素瘤细胞黑素合成的影响,以期揭示其可能机制,并初步探讨维生素类药物应用于临床治疗黄褐斑和白癜风的作用机理。
  方法:采用MTT法测定不同浓度维生素C、维生素E、维生素B1、维生素B6及维生素B12对人A375黑素瘤细胞生长增殖的影响,确定维生素对人A375黑素瘤细胞影响的浓度,采用FCM检测维生素对人A375黑素瘤细胞周期的影响,运用NaOH氧化法测定细胞中黑素含量、多巴氧化法测定细胞酪氨酸酶的活性,观察维生素对人A375黑素瘤细胞黑素合成的影响。
  结果:1.MTT法实验结果显示:24h时,各浓度 VitC、VES、VitB1、VitB6及VitB12与空白对照组比较,差异均没有显著统计学意义(p>0.05);48h时,VitC和VES都可抑制人A375黑素瘤细胞生长(p<0.05),0.01μg/ml VitB1、0.01μg/ml VitB6和0.01μg/ml VitB12促进人A375黑素瘤细胞生长(p<0.05),高浓度VitB1(10μg/ml、20μg/ml)、VitB6(10μg/ml、20μg/ml)和VitB12(10μg/ml、20μg/ml)则抑制人A375黑素瘤细胞生长(p<0.05),而其他组与空白对照组比较没有统计学意义(p>0.05);72h时 VitC和VES均显著抑制人 A375黑素瘤细胞生长(p<0.01),低浓度 VitB1 (0.01μg/ml)、VitB6(0.01μg/ml)和VitB12(0.01μg/ml)促进人 A375黑素瘤细胞生长(p<0.05),而高浓度的VitB1(10μg/ml、20μg/ml)、VitB6(10μg/ml、20μg/ml)和VitB12(10μg/ml、20μg/ml)则抑制人A375黑素瘤细胞生长(p<0.05)。
  2.FCM检测结果显示:0.05mg/ml VitC、5.0μg/ml VitE组细胞G2+S期细胞比例显著低于对照组(p<0.01);0.01μg/ml VitB1、0.01μg/ml VitB6、0.01μg/ml VitB12处理组细胞G2+S期细胞比例高于对照组(p<0.01)。
  3.多巴氧化法和NaOH氧化法检测结果显示:低浓度VitB1(0.01μg/ml)、VitB6(0.01μg/ml)和VitB12(0.01μg/ml)处理人A375黑素瘤细胞后酪氨酸酶活性增加、黑色含量增加(p<0.05);0.05mg/ml VitC、5.0μg/ml VES能抑制酪氨酸酶活性,减少黑素形成(p<0.05)。
  结论:
  1.维生素C、维生素E能抑制人A375黑素瘤细胞的生长,抑制酪氨酸酶的活性,减少黑素的生成。
  2.维生素B1、维生素B6、维生素B12对人A375黑素瘤细胞的生长、酪氨酸酶的活性及黑素生成的影响具有双向的调节作用。

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