硫化氢通过上调SIRT1减轻慢性应激诱导的大鼠海马内质网应激

摘要

【研究背景与目的】：
　　慢性应激可损伤海马神经元。硫化氢(Hydrogen sulfide, H2S)是一种神经保护作用的新型气体信号分子。我们以往的工作发现 H2S可拮抗慢性应激诱导的大鼠海马损伤，但其机制尚未阐明。内质网(endoplasmic reticulum, ER)应激在神经损伤中具有重要地位。沉默信息因子1(Silence information regulator-1, SIRT1)是一种组蛋白脱乙酰酶，具有神经保护作用。据此，我们推测 H2S可通过上调 SIRT1的表达拮抗慢性应激诱导的海马 ER应激而实现其抗慢性应激诱导海马损伤的作用。
　　本研究拟建立慢性非预期温和性应激(Chronic Unpredictable Mild Stress, CUMS)模型，探讨H2S对慢性应激致海马ER应激的拮抗作用并研究SIRT1对H2S这一作用的介导效应。
　　【方法】：
　　采用大鼠脑立体定位仪对Wistar大鼠行右侧侧脑室埋管，以微量注射器对大鼠侧脑室注射SIRT1抑制剂Sirtinol(10 nmol/只，icv,2 w)，腹腔注射NaHS(30,100μmol/kg, ip,2 w)，Western blotting检测SIRT1,C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)，Cleaved caspase-12和糖调节蛋白78(Glucose regulated protein78,GRP78)蛋白的表达。
　　【结果】：
　　1. H2S减轻 CUMS大鼠海马 ER应激
　　NaHS治疗组[CUMS4 w，在CUMS后2 w给以30或100μmol/kg(ip)治疗]大鼠海马ER应激标志蛋白GRP78, CHOP and Cleaved caspase-12表达量显著低于CUMS(4 w)组，表明H2S可抑制CUMS诱导的大鼠海马 ER应激。
　　2. H2S上调 CUMS大鼠海马 SIRT1的表达
　　CUMS(4 w)可明显降低大鼠海马SIRT1的表达水平；而NaHS(30或100μmol/kg, ip,2 w)可逆转CUMS对大鼠海马SIRT1表达的抑制作用，提示 H2S可上调 CUMS大鼠海马 SIRT1的表达。
　　3.抑制 SIRT1可逆转H2S对CUMS诱导海马 ER应激的拮抗作用
　　与NaHS治疗组[CUMS4 w, CUMS2 w后给以NaHS(30μmol/kg, ip)处理2 w]比较，sirtinol处理组[CUMS4 w, CUMS后2 w, sirtinol(10 nmol/只, icv)合用NaHS(30μmol/kg, ip)处理2 w]海马组织ER应激相关标志蛋白(GRP78, CHOP and Cleaved caspase-12)表达水平显著增加，表明 SIRT1抑制剂(sirtinol)可逆转 H2S对CUMS所致海马 ER应激的拮抗作用。
　　【结论】：
　　1. H2S可通过改善 ER应激拮抗 CUMS所致海马神经损伤。
　　2. SIRT1介导H2S的抗 CUMS所致海马 ER应激作用。

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前言

1. 慢性应激诱导大鼠海马神经损伤

2. 硫化氢 (新型的气体信号分子) 可拮抗大鼠海马神经损伤

3. 内质网应激在神经损伤中具有重要地位

4. H2S 可通过拮抗 ER 应激发挥神经保护作用

5. 沉默信息调节因子 1 具有神经保护作用

6. 本课题的科研问题和研究思路

材料与方法

1.主要试剂和主要仪器

2. 试剂和药品的配制

3.实验方法

4.统计分析

结果

1. H2S 减轻 CUMS大鼠海马内质网 (ER) 应激

2. H2S 上调 CUMS 大鼠海马 SIRT1 的表达

3.抑制 SIRT1 可逆转 H2S 对 CUMS 诱导大鼠海马 ER 应激的拮抗作用

讨论

1. CUMS模型及其与海马神经损伤的联系

2. H2S拮抗慢性应激诱导海马神经ER应激

3. 硫化氢通过上调 SIRT1 拮抗慢性应激诱导的大鼠海马神经ER 应激

结论

参考文献

文献综述

参考文献

硕士期间发表的论文

致谢