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三种茶藨属植物离体快繁技术研究

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独创性声明及关于论文使用授权的说明

1前言

2试验设计与方法

3结果与分析

4讨论

5结论

参考文献

附录1图版与说明

附录2缩略语

致谢

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摘要

本文以楔叶茶藨、长白茶藨和‘寒丰’品种为试材,对离体快繁过程中的初代培养、芽的增殖、愈伤组织诱导及再生、生根四个阶段的相关问题进行了详细研究。本试验首次成功地建立了楔叶茶藨、长白茶藨和‘寒丰’品种组培无性系,为今后进一步开展生物技术研究奠定了基础。主要得出以下几方面结论: 1将茶藨属植物解除休眠但未萌发的枝条在室内水培,以嫩梢顶部或带有腋芽的茎段为外植体,采用适当的方法可以有效的进行外植体消毒和污染控制。用含有0.1﹪的HgCl2和2滴吐温的溶液浸泡8min,污染率可控制在55﹪以下;或者用硫酸庆大霉素100mg/L水溶液浸泡楔叶茶藨茎段30min后用0.1﹪升汞水溶液消毒8min,污染率可控制在10﹪以下,成活率达80﹪。初代培养采用的基本培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L。 2适宜三种属茶藨植物组培苗的增殖培养条件分别为:楔叶茶藨为MS+BA1.0mg/L+IBA0.05-0.2mg/L,;长白茶藨和‘寒丰’为MS+BA1.0mg/L+GA31.0-2.0mg/L。继代周期以25-30天为宜,合适的接种密度为每瓶3-5株。3硝酸银可以防止茶藨属植物组培苗褐化。在培养基中加入0.5-5.0mg/L的硝酸银,组培苗褐化率可控制在20﹪以下。 4用白糖可代替藨糖作为三种茶藨组培苗分化和增殖MS培养基的碳源。 5三种茶藨属植物组培苗叶片或叶柄均能诱导出愈伤组织。其中长白茶藨和‘寒丰’叶片采用MS+2,4-D0.8-1.0mg/L,长白茶藨愈伤组织增殖培养基可采用MS+2,4-D1.0mg/L、BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L、MS+BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L或附加CH500mg/L。楔叶茶藨叶片采用MS+BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L,或MS+BA2.0mg/L+2,4-D2.5mg/L;叶柄采用MS+2,4-D2.0mg/L,或MS+BA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/。其中楔叶茶藨愈伤组织再生出了不定芽。 61/2MS培养基对茶藨属植物组培苗生根有利。单独使用NAA比单独使用ZT或IAA更利于长白茶藨组培苗不定根的形成,NAA适宜浓度为0.01-0.05mg/L。而楔叶茶藨和‘寒丰’的组培苗在1/2MS+IBA1.0mg/L生根效果最佳。

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