芹菜素对成骨肉瘤MG-63细胞凋亡和GSH含量的影响

摘要

目的:观察芹菜素(API)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用，并探讨其作用机制是否涉及耗竭细胞谷胱甘肽(GSH)。
　　方法:体外培养人成骨肉瘤MG-63细胞系细胞。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率(Sub G1细胞百分率)。琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA核小体间断裂。分光光度法测定细胞内GSH含量。
　　结果:PI染色FCM分析结果表明，API显著增加人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡率，呈浓度依赖性。细胞基因 DNA琼脂糖凝胶电泳发现，API(40.0、80.0μmol/L)和80.0μmol/L甲氨蝶呤(MTX)诱导MG-63细胞DNA核小体间断裂，呈现典型凋亡DNA梯形条带图谱。API以浓度依赖方式降低MG-63细胞内GSH含量。更为重要的是增添外源性GSH(500μmol/L)能有效恢复API处理MG-63细胞内GSH水平；同时，显著拮抗API诱导MG-63细胞凋亡率增加和细胞DNA核小体间断裂。
　　结论:
　　1. API具有诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用，呈浓度依耐性。
　　2. API可通过耗竭细胞内GSH从而诱导MG-63细胞凋亡。

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前言

材料与方法

1 材料

1.1 细胞与细胞培养

1.2 受试物与试剂

1.3仪器设备

2 方法

2.1 试剂配制

2.2 DNA琼脂糖凝胶电泳

2.3 PI染色FCM分析

2.4 细胞内GSH含量测定

2.5 外源性还原型GSH对API作用的影响

2.7 统计学处理

实 验 结 果

3.1 API对成骨肉瘤MG-63细胞凋亡率的影响

3.2 API对成骨肉瘤MG-63细胞DNA断裂的影响

3.3 API对成骨肉瘤MG-63细胞内GSH含量的影响

3.4 外源性GSH对API降低成骨肉瘤MG-63细胞内GSH含量的影响

3.5 外源性GSH对API诱导成骨肉瘤MG-63细胞凋亡率增加的影响

3.6 外源性GSH对API诱导成骨肉瘤MG-63细胞DNA断裂的影响

讨论

结论

参考文献

综述：

硕士期间发表论文

致谢