5,7-二甲氧基黄酮对肺癌A549细胞凋亡及GSH含量的影响

摘要

目的:观察5,7-二羟基黄酮(白杨素，ChR)的新型类似物5,7-二甲氧基黄酮(5,7-DMF)诱导人肺癌A549细胞凋亡作用，并探讨其诱导凋亡作用是否涉及细胞内谷胱甘肽(GSH)耗竭。
　　方法:体外培养肺癌 A549细胞，碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率；琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA核小体间断裂；分光光度法测定细胞内GSH含量。
　　结果:PI染色FCM结果显示，5,7-DMF(0.3、3.0、30.0μmol/L)孵育24 h，人肺癌A549细胞凋亡率依次增加，呈剂量依赖性。DNA琼脂糖凝胶电泳观察发现30.0μmol/L5,7-DMF和0.3μmol/L紫杉醇(taxol, Tax)作用A549细胞24 h，展示出凋亡的典型DNA梯形条带。分光光度法测定结果证明，5,7-DMF(0.3、3.0、30.0μmol/L)孵育3 h，A549细胞内GSH含量随着药物浓度的增高逐次降低。在添加外源性还原型GSH的干预实验中，500μmol/L GSH预孵育1 h，能够有效拮抗5,7-DMF(0.3、3.0、30.0μmol/L)诱导A549细胞GSH耗竭作用；同时，有效阻断5,7-DMF促进A549细胞凋亡率增加效应；亦能消除30.0μmol/L5,7-DMF导致的细胞基因DNA梯形条带图谱。
　　结论:
　　1.5,7-DMF具有诱导人肺癌A549细胞凋亡作用，呈浓度依耐性。
　　2.5,7-DMF诱导人肺癌A549细胞凋亡作用与其耗竭细胞内GSH相关。

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前言

材料与方法

1 材料

1.1 细胞与细胞培养

1.2 受试物与试剂

1.3仪器设备

2 方法

2.1 PI染色FCM分析

2.2 DNA琼脂糖凝胶电泳

2.3 细胞内GSH含量测定

2.4 外源性还原型GSH的干预处理

2.5 统计学处理

实 验 结 果

3.1 5,7-DMF对人肺癌A549细胞凋亡率的影响

3.2 5,7-DMF对肺癌A549细胞DNA核小体间断裂的影响

3.3 5,7-DMF对人肺癌A549细胞内GSH含量的影响

3.4外源性GSH对5,7-DMF诱导肺癌A549细胞GSH耗竭的影响

3.5 外源性GSH对5,7-DMF诱导肺癌A549细胞凋亡率增高作用的影响

3.6 外源性GSH对5, 7-DMF诱导肺腺癌A549细胞DNA核小体间断裂的影响

讨论

结论

参考文献

综述：

硕士期间发表论文

致谢