树突状细胞在实验性末端回肠炎发病中的变化及其意义

摘要

目的：探讨树突状细胞（dendritic cell，DC）在实验性末端回肠炎发病中的变化及其意义。
　　方法：120只雄性SD大鼠，被随机分为Z（造模组）、F（缝线组）、D（对照组）三组，每组40只。上述三组予以不同的实验处理，Z组将末端回肠、盲肠行侧侧吻合术，形成盲肠-末端回肠反流模型，F组于末端回肠、盲肠处仅作缝线手术，制造与Z组相似的损伤，D组仅行常规腹腔麻醉。术后2周、8周每组随机抽取20只SD大鼠，脱颈处死，取末端回肠组织肉眼观察并进行炎症评分，苏木精-伊红(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色，观察病理学变化及予以镜下炎症评分，免疫组化检测CD1a、CD83的表达情况并分析，透射电子显微镜(Transmission Electron Microscopy,TEM)下观察DC的形态特征。
　　结果：
　　1.末端回肠组织肉眼观察及镜下观察术后2周，Z组、F组均有不同程度的急性炎症改变，黏膜充血水肿，可见中性粒细胞浸润，两组炎症评分均较D组高（P<0.05）；术后8周，Z组可见典型慢性炎症改变，炎症累及黏膜层及黏膜下层，肠壁增厚，绒毛结构不清， 腺体减少或消失，淋巴滤泡增生，淋巴细胞和浆细胞浸润。而F组、D组未见明显炎性改变，Z炎症评分较F组、D组高(P<0.05)。
　　2.透射电子显微镜下观察DC的形态 D组2周、8周时可见一些DC，细胞体积较小、近似圆型，突起短少，胞质密度低，细胞器数目较少，含较多囊泡状结构，胞核外形不规则，表面可见凹陷，染色质淡，可见核仁，具有未成熟DC的形态特征。Z组2周、8周时DC数目明显增多，细胞体较大，形状不规则，细胞表面树枝样突起增多、增长，胞浆内可见大量的细胞器，囊泡状结构少，胞核形态多样，位于细胞的一侧，可见清晰的核膜，胞核异染色质增粗，具有成熟DC的形态特征。
　　3.末端回肠组织CD1a的表达水平免疫组化染色显示三组SD大鼠末端回肠组织中CD1a于黏膜及黏膜下层均阳性表达。术后2周，三组SD大鼠末端回肠组织CD1a阳性细胞浸润密度进行比较，总体来说差异有统计学意义（P<0.05），Z组最高，F组其次,D组最低；术后8周，Z组CD1a阳性细胞浸润密度最高，较F组、D组比较，差异有统计学意义（P<0.05），而F组较D组，差异无统计学意义（P>0.05）。Z组2、8周时，炎症评分1-4分组、4-8分组、8-13分组三组黏膜中CD1a阳性细胞浸润密度进行比较，差异均有统计学意义（P<0.05)，以8-13分组最高，且CD1a的表达水平与炎症程度呈正相关。
　　4.末端回肠组织CD83的表达水平免疫组化染色显示Z组、F 组SD大鼠CD83阳性表达，呈棕黄色，主要位于黏膜及膜下层，D组弱表达或不表达。术后2周，Z组、F组CD83阳性细胞数明显增多，上述两组CD83阳性细胞浸润密度较D组比较，差异均有统计学意义（P<0.01），以Z组最高；术后8周，Z组CD83阳性细胞浸润密度最高，较F组、D组比较，差异有统计学意义（P<0.05），而F组较D组，差异无统计学意义（P>0.05）。Z组2周、8周时，炎症评分1-4分组、4-8分组、8-13分组三组黏膜中CD83的阳性细胞浸润密度进行比较，差异均有统计学意义（P<0.05)，均显著高于D组，且CD83的表达水平与炎症程度呈正相关。
　　结论：
　　1.ETI中DC的形态、结构由未成熟型向成熟型转变，可能与抗原摄取、呈递功能有关。
　　2.ETI黏膜中CD1a+DC、CD83+DC明显增多，且与炎症程度呈正相关。
　　3.DC形态、结构、功能的改变，提示它参与了ETI的发病，可能与激活肠道免疫系统有关。

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目录

第1章 前言

第2章 研究方法

2.1实验材料和设备

2.2实验技术路线

2.3实验方法

第3章 实验结果

3.1末端回肠组织肉眼观察及炎症评分

3.2 末端回肠组织镜下观察及炎症评分

3.3 透射电子显微镜下末端回肠组织中DC的形态

3.4 CD1a的表达情况

3.5 CD83的表达情况

第4章 讨论

4.1建立ETI动物模型的评判

4.2 CD1a、CD83在ETI中的表达

4.3 DC在ETI末端回肠组织中的分布

4.4 DC在ETI末端回肠组织中的作用及意义

第5章 结论

参考文献

综述：树突状细胞发育与迁移机制的研究进展

作者攻读学位期间的科研成果

致谢