维生素C通过TET2介导的EKL1启动子去甲基化调控apo(a)的表达

摘要

[背景]
　　人血浆脂蛋白a[lipoprotein a, Lp(a)]水平与血管动脉粥样硬化密切相关。大量的研究表明高血浆脂蛋白a水平会增加血管发生动脉粥样硬化的风险。流行病学调查发现大约有1/5的人群血浆脂蛋白a高于正常水平。目前还没有药物能特异性的降低血浆中脂蛋白a的浓度。因此研究新的，特异性降低血浆脂蛋白a的药物，显得尤其重要。新的研究表明维生素C能够降低转基因小鼠血浆脂蛋白a的水平，但其具体的机制目前还不清楚。研究还发现脂蛋白a的结构主要由载脂蛋白a[apoliprotein a,[apo(a)]]和一个低密度脂蛋白（LDL）核心构成，apo（a）通过二硫键与LDL核心上的载脂蛋白B-100[apolipoprotein B-100,(apoB100)]相连。其中apo（a）是脂蛋白a的特异性成分，是脂蛋白a合成的限制因素。因此我们推测维生素C是通过降低apo（a）的合成，来进一步限制脂蛋白a合成，最后达到降低血浆脂蛋白a的作用。
　　[目的]
　　探究维生素C对apo（a）合成的影响及机制。
　　[方法]
　　用不同浓度，以及相同浓度不同处理时间的维生素C处理HepG2细胞，检测维生素C对apo（a）表达的影响。用小干扰RNA（siRNA）转染，实时荧光定量PCR,蛋白质免疫印迹，染色质免疫共沉淀，DNA免疫共沉淀-qPCR,DNA斑点印迹杂交，ELISA等试验方法研究维生素C影响apo（a）表达的机制。
　　[结果]
　　1、低于400μM浓度的维生素C能促进apo（a）表达，400-800μM浓度的维生素C能抑制apo（a）表达；2、维生素C促进了ELK1的表达；3、维生素C通过ELK1抑制 HepG2细胞apo（a）表达；4、维生素C增加了ELK1 CpG岛5hmC的水平；5、维生素C增加了ELK1 CpG岛5hmC的水平；6、维生素C通过TET2增加了HepG2细胞基因组5hmC水平；7、维生素C通过TET2促进ELK1表达。
　　[结论]
　　维生素C能在400-800μM浓度范围内抑制apo（a）表达；维生素C通过TET2介导的ELK1启动子去甲基化抑制apo（a）的表达。

目录

声明

主要缩略语中英文索引

第1章 绪论

第2章 实验材料及实验方法

2.1实验材料与仪器

2.2 实验方法

第3章 实验结果

3.1 维生素C对HepG2细胞apo（a）表达水平的影响

3.2 维生素C促进了ELK1的表达

3.3 维生素C通过ELK1抑制 HepG2细胞apo（a）表达

3.4 维生素C增加了HepG2细胞基因组5hmC的水平

3.5 维生素C增加了ELK1 CpG岛5hmC的水平

3.6 维生素C通过TET2增加了HepG2细胞基因组5hmC水平

3.7 维生素C通过TET2 促进ELK1表达

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

文献综述

攻读学位期间所获科研成果

致谢