黄瓜及其它几种葫芦科植物内生真菌资源的初步研究

摘要

从北京郊区及附近地区的海淀、通州、大兴、河北廊坊等地的蔬菜基地，采集生长于露地和温室、普通生产基地和有机生产基地、栽培和自生等不同环境下的黄瓜及其它常见葫芦科蔬菜的植株样本，进行内生真菌的分离培养。 对获得的具代表性的228株内生真菌进行形态学鉴定和rDNA ITS区域及18S部分区域的序列分析，共鉴定出13属真菌。其中黄瓜的内生真菌包括Fusarium oxysporum Schltdl．（尖孢镰刀菌）、Chaetomium globosum Kunze（球毛壳菌）、Epicoccum nigrum Link（黑附球菌）、Myrothecium roridum Tode（露湿漆斑菌）、Trichoderma longibrachiatum Rifai（长枝木霉）、Trichoderma reesei Simmons（里氏木霉）、Alternaria alternata（Fr．）Keissl．（链格孢）、Cladosporium cladosporioides（Fresen．）de Vries（枝状枝孢）、Penicillium brevicompactum Dierckx（短密青霉）、Aspergillus ochraceusWilh．（棕曲霉）等11属20种，Fusarium oxysporum为优势种，占45．7％。甜瓜和丝瓜的优势种与黄瓜中的一样为Fusarium oxysporum，西瓜的优势种为Colletotrichum sp．（刺盘孢），南瓜和葫芦的优势种为Alternaria alternata。 在研究过的样品中，Chaetomium globosum和Epicoccum nigrum只在黄瓜上发现，Exserohilum rostratum（Drechsler）K．J．Leonard&Suggs（嘴突突脐蠕孢）只在西瓜和丝瓜中发现，Curvularia lunata（Wakker）Boedijn（弯孢）、Curvularia interseminata（Berk．&Ravenel）J．C．Gilman（间型弯孢）、Rhizoctonia sp，（丝核菌）分别只在南瓜、丝瓜和甜瓜中发现。Trichoderma longibrachiatum和Myrothecium roridum被首次作为内生菌报道，Epicoccum nigrum作为葫芦科植物内生菌也是首次报道。 统计结果表明，露地栽培黄瓜中的内生真菌种类多于温室中的黄瓜，有机蔬菜基地黄瓜中的内生真菌种类多于普通蔬菜基地中的黄瓜。内生真菌的分离率以上部茎中最高，其次是根部和下部茎。在平板对峙试验中，1株尖孢镰刀菌对黄瓜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum（Lib．）de Bary）表现较好的拮抗作用，1株长枝木霉对黄瓜多种病原菌均表现出较好拮抗作用，还有一些菌株对黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f．sp．cucumerinum Owen．）表现出不同程度的拮抗作用。接种试验表明，由黄瓜植株分离得到的83．5％的内生尖孢镰刀菌菌株对黄瓜无致病性。接种再分离试验发现，尖孢镰刀菌可以在黄瓜的根、茎等部位定植，并表现一定优势。 研究结果初步揭示了黄瓜和部分其它瓜类内生真菌概况，对其生物学功能及其相互间及与植物间的关系有了初步认识，为瓜类内生真菌资源的进一步研究和利用奠定了基础。

目录

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第一章 引言

1.1人类对植物内生真菌的认识

1.1.1概念及分布研究

1.1.2开发及应用研究

1.1.3存在问题

1.2植物内生真菌的生物学和生态学

1.2.1内生真菌资源及生物学研究

1.2.2植物内生微生态研究

1.2.3植物-内生真菌相互作用研究

1.3植物内生真菌的农业应用研究

1.3.1促生作用研究

1.3.2抑菌活性研究

1.3.3抗虫作用研究

1.3.4内生非致病真菌的应用研究

1.3.5其它活性研究

1.4植物内生真菌的分离及鉴定方法

1.4.1植物内生真菌的分离

1.4.2内生真菌形态鉴定

1.4.3内生真菌分子鉴定

1.5黄瓜及葫芦科植物内生真菌研究现状

1.6本研究的目的和意义

第二章葫芦科植物内生真菌的分离及鉴定

2.1材料与方法

2.1.1植物样品

2.1.2试验用品及仪器

2.1.3研究方法

2.2结果与分析

2.2.1分离方法比较

2.2.2分离结果统计

2.2.3菌种鉴定

2.3讨论

2.3.1分离方法

2.3.2菌株纯化

2.3.3菌株鉴定

2.3.4西瓜内生真菌类群比较

2.3.5黄瓜内生真菌类群分析比较

2.3.6植物-内生真菌-环境的互作关系

第三章植物内生真菌生物学功能的初步研究

3.1材料与方法

3.1.1试验材料

3.1.2研究方法

3.2结果与分析

3.2.1供试菌株的抑菌谱的测定

3.2.2供试菌株对黄瓜枯萎病菌的抑制作用

3.2.3供试菌株对黄瓜菌核病病菌的抑制

3.2.4供试菌株间的互作

3.2.5致病性测定结果

3.3讨论

3.3.1抑菌谱的测定

3.3.2抑菌活性的比较

3.3.3植物内生真菌的回接方法

3.3.4致病性测定

3.3.5植物内生真菌之间的互作关系

第四章结论

参考文献

致谢

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