长白山区野生白檀居群遗传多样性研究

摘要

白檀（Symplocos paniculata (Thunb.) Miq.）;山矾科（Symplocaceae）山矾属（Symplocos）植物;在我国大部分地区均有分布;白花蓝果;具有较高的观赏价值。果实中富含花青素和油脂;具有较好的开发利用潜力。本文采用形态学标记与ISSR、SRAP分子标记相结合的方法;对长白山区野生白檀资源遗传多样性进行研究;以期为优异白檀资源的收集、筛选及综合开发利用提供理论参考。研究结果如下： 1.野生白檀居群表型性状变异较丰富。表型性状的平均多样性指数为4.5;平均变异系数为13.96%;其中白檀果实的变异程度最高。Duncan多重比较表明;16个表型性状中; 10个表型性状在居群内和居群间表现出显著差异。在野生白檀居群19个表型性状主成分分析中;8个主因子累计贡献率达到75.24%;基本能够以此代表白檀表型性状信息。 2.采用单因素与正交试验相结合的方法;建立了白檀SRAP-PCR体系：10μL体系中; Taq DNA聚合酶0.75U、dNTPs 0.1mmol/L、Mg2+2mmol/L、引物0.4μmol/L以及模板DNA 80ng。利用上述体系进行白檀SRAP引物筛选;从176对引物组合中筛选出具有多态性且能够稳定扩增的引物组合25对。对96份白檀样品进行扩增;共获得306条谱带;其中240条为多态性谱带;平均多态性比率达78.12%。 3.对白檀SRAP-PCR扩增结果分析表明;野生白檀遗传多样性水平高;且不同居群之间差异显著。从多态性百分率、基因多样度和多样信息指数来看;居群A的遗传多样性最为丰富;居群C的遗传多样性程度最低。白檀无论在居群水平还是在个体水平上;都具有较好的遗传多样性;遗传变异主要来自于居群内;居群间较少。白檀居群间存在频繁的基因交流（Nm=5.21）;居群间的遗传分化程度较低（Gst=0.09）;遗传距离较小;在0.05~0.10之间。UPGMA聚类将4个野生白檀居群划分为3大类。 4.采用单因素与正交试验相结合的方法;优化了白檀ISSR-PCR体系：10μL体系中; Taq DNA聚合酶0.75U、dNTPs 0.1mmol/L、Mg2+2mmol/L、引物0.5μmol/L以及模板DNA 80ng。利用上述体系进行白檀ISSR引物筛选;从100条引物中筛选出22条具有多态性且能够稳定扩增的引物;并对96份白檀样品进行扩增;共得到259条谱带;其中多样性谱带为207条;平均多态性比率达到79.45%。 5.对白檀ISSR-PCR扩增结果分析表明;野生白檀遗传多样性水平高;且不同居群之间差异显著。从多态性百分率、基因多样度和多样信息指数来看;居群A的遗传多样性最为丰富;居群D的遗传多样性程度最低。白檀无论在居群水平还是在个体水平上;都具有较好的遗传多样性;遗传变异主要来自于居群内;居群间较少。白檀居群间存在频繁的基因交流（Nm=5.30）;居群间的遗传分化程度较低（Gst=0.08）;遗传距离较小;在0.06~0.13之间。UPGMA聚类将4个野生白檀居群划分为4大类。分子标记与形态标记相结合更有利于野生白檀资源的遗传多样性分析。

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