吉林左家、河北昌黎两地乌苏里貉三种血液病原菌检测及致病性分析

摘要

粘质沙雷氏菌、木糖氧化无色杆菌、草绿色链球菌均是条件致病菌，粘质沙雷氏菌和木糖氧化无色杆菌为革兰氏阴性菌，草绿色链球菌为革兰氏阳性菌。长期以来，由它们引起的疾病并不常见，还有一些人认为是有益菌，因此一直未被人们所重视。随着社会的发展，由多种病原菌引起疾病的相关报道也日益增加，许多病原菌引起疾病的发病情况、病情表现十分相近，且许多是混合感染，导致医生经验用药的情况持续发生且滥用抗生素的现象也十分普遍，造成医药费的严重浪费，由此许多病原菌在机体内发生变异，耐药性及致病性都有所增强，甚至有许多病原菌已出现多重耐药的情况。以上三种病原菌分别引起的疾病在临床医学上也越来越常见，近年相关文献报道逐渐增加，以上三种致病菌在健康人及动物体内存在，使人身安全受到潜在威胁。感染这几种菌有许多相似的病症，如宿主出现局部脓肿、发育不良、肺炎等，这给疾病诊断带来一定的干扰，也冲击养殖业的发展。作为人畜共患病的病原菌，在医学、兽医学领域意义重大。在对僵化乌苏里貉、病死乌苏里貉（以下称僵貉、病死貉）的研究中发现了以上三种菌。因此，急需开展对健康动物血液病原菌的检测调查，完善相关文献报道。 鉴于以上原因，本研究第一部分对吉林左家养殖基地、河北昌黎两地共采集到的153份乌苏里貉进行血液进行病原菌检测调查（其中包括解剖收集6份僵貉、7份病死貉肝脏，其余均为健康乌苏里貉血液）。采用16S rRNA 基因序列特异性扩增方法检测血液样品，对阳性样品克隆测序，通过构建系统发育树探寻每种病原菌的同源性差异;第二部分对检测到木糖氧化无色杆菌的僵化貉和病死貉肝脏进行细菌分离纯化培养，将分离到的木糖氧化杆菌菌株进行动物致病性试验及分析，为预防吉林、河北两地毛皮动物因木糖氧化无色杆菌引发疾病提供一些参考。 1. 吉林左家养殖基地、河北昌黎县散养户乌苏里貉血液病原菌的调查及系统发育分析 在两地共选取153份血液样品通过细菌16S rRNA 基因通用引物序列进行PCR扩增,阳性样品（1500bp左右）经克隆测序得出有草绿色链球菌4.58%（7/153）、节杆菌1.31%（2/153）、木糖氧化无色杆菌32.68%（50/153）、粘质沙雷氏菌5.23%（8/153）、微杆菌1.31%（2/153）、嗜麦芽窄食单胞菌1.31%（2/153），其中在河北昌黎散养户中检测到以上6种菌，吉林左家养殖基地只检测到木糖氧化无色杆菌，检测阳性率排前三的分别是木糖氧化无色杆菌、粘质沙雷氏菌和草绿色链球菌，将以上三种测序结果结合参考序列建立系统发育树，初步确定木糖氧化物色杆菌属于无色杆菌属;粘质沙雷氏菌属于沙雷氏属;草绿色链球菌属于链球菌属。 2.动物致病性试验 应用在僵貉、病死貉肝脏中分离出的木糖氧化无色杆菌，给小鼠腹腔注射进行动物致病性研究，试验结果表明：在48小时内吉林、河北两地共有8株组别致小鼠死亡，占总分离菌株61.54%。其中吉林地区致小鼠死亡情况较河北严重。

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