液相色谱在线净化及峰拖尾抑制研究

摘要

二维液相色谱成为现代复杂样品分析研究的重要手段。其发展经历了离线二维色谱分析和在线色谱分析两个重要阶段。二维液相色谱的特点包括可对样品进行在线纯化、富集，减少了样品前处理步骤，大量的减少了人力和试剂的消耗，也使一些浓度极低样品分析检测成为可能。本文使用二维液相色谱建立了维生素B12的检测和人乳低聚糖的在线分析。具体工作包括以三个方面:
　　1.本实验研究了在反相液相色谱中铯离子作为硅羟基抑制剂的能力，并用不同的方法表征了硅羟基的活性。在常规的C18柱中用6种基础探针溶质在pH等于7的环境下，比较了三乙胺、辛胺、铯离子、钡离子作为硅羟基抑制剂与硅羟胺相互作用时抑制离子交换的能力。不同的添加剂的氢键作用力的抑制力也通过使用甲苯胺同分异构体、对乙基苯胺、苯胺和苯酚作为探针溶质而被表征出来。结果表明，Cs+对硅羟基与物质键合的抑制能力强于Ba2+。就Cs+在离子交换和亲硅羟基作用的抑制能力方面而言，Cs+表现出比Ba2+更好的抑制峰拖尾效应。在弱酸性条件下用Cs+做流动相添加剂来分析原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜赤碱这四种生物碱时，能获得较好的抑制硅羟基与碱性化合物键合的效果。
　　2.该研究建立了一种新的可以测试婴幼儿、成人配方奶粉、液体奶、浓缩液体奶、即食营养品等中维生素B12的色谱方法。该法使用固相萃取小柱净化并且富集样品中目标物的浓度，使用分子排阻色谱和反相色谱在线将维生素B12从干扰物中分离开来，并用可见光检测器在550 nm波长处检测维生素B12的浓度。该方法线性范围由2.6到26μg/L，加标样品回收率高于90％。
　　3.该文章使用离子色谱配备安培检测器(ICS-PAD)建立了一种灵敏的同时检测六种人乳低聚糖的方法。使用NG1柱在线净化人乳低聚糖并使用PA20柱分离检测。该方法定量限从0.02到0.15，检测限从0.01到0.04。加标样品回收率于90％至105％之间。绝大部分准确度与精密度测试实验数据的相对标准偏差在10％以内。

目录

摘要

第一章 绪论

1．1 引言

1．2 高效液相色谱及离子色谱

1．2．1 高效液相色谱

1．2．2 离子色谱

1．3 二维色谱及柱切换技术

1．4 ODS柱、硅羟基效应、硅羟基活性检测方法

1．4．1 ODS柱

1．4．2 硅羟基效应

1．4．3 硅羟基活性检测方法

1．5 生物碱、峰拖尾

1．5．1 生物碱

1．5．2 峰拖尾

1．6 维生素B12及其常规检测方法

1．6．1 维生素B12

1．6．2 传统维生素B12检测方法

1．7 人乳低聚糖及其常规检测方法

1．7．1 人乳低聚糖

1．7．2 传统人乳低聚糖的检测方法

1．8 本课题研究意义

第二章 在反相液相色谱中用铯离子抑制硅羟基与碱性物质结合的研究

2．1 引言

2．2 实验试剂与方法

2．2．1 实验试剂

2．2．2 探针溶液和标准品溶液的制备

2．2．2 实验仪器

2．3 结果与讨论

2．3．1 在最易发生交换条件下比较探针溶液与硅羟基抑制剂竞争结合残留硅羟基的能力

2．3．2 使用硅羟基抑制剂时抑制能力强弱的表征

2．3．3 铯离子作为硅羟基抑制剂分析生物碱的应用

2．4 小结

第三章 用柱切换技术反相高效液相色谱法对婴儿与成人营养品中维生素B12测定方法

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 实验试剂

3．2．2 实验仪器

3．2．3 色谱条件

3．2．4 标准品及其他溶液配制

3．2．5 样品处理

3．3 结果与讨论

3．3．1 SPE柱的选择

3．3．2 峰拖尾抑制剂选择

3．3．3 线性与稳定性

3．3．4 方法检测限与定量限

3．3．5 准确度

3．3．6 实际样品分析

3．4 小结

第四章 六种人乳低聚糖分析方法的建立以及对中国母乳含量亘分析

4．1 引言

4．2 实验部分

4．2．1 实验试剂

4．2．2 实验仪器

4．2．3 色谱条件

4．2．4 标准品溶液配制及样品处理

4．3 结果与讨论

4．3．1 线性与稳定性

4．3．2 方法检测限与定量限

4．3．3 准确度与精密度

4．3．4 实际样品分析

4．4 小结

结语

参考文献

攻读学位期间发表的相关论文

致谢

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